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第一部分 专题九 生物技术实践
1.(2016·宁夏银川三模)微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识,分析回答问题:
(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化和B:________、A:________等过程,上述过程中需要在超净工作台上操作的是________。
(2)纯化菌种时为得到单菌落,常采用的接种方法是平板划线法和D:________,其中需用接种环进行操作的是________。
(3)为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的,平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的________,培养基中加入________指示剂培养后,若变红则其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌,在选择培养后须进行E:________和F:________过程,一般通过观察________的有无挑选出所需菌种。
解析:(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化、[B]灭菌、[A]倒平板等过程,其中倒平板需要在超净工作台上操作。
(2)常采用的微生物接种方法是平板划线法和[D]稀释涂布平板法。其中平板划线法需用接种环进行操作。
(3)欲筛选土壤中分解尿素的细菌,培养基中应以尿素作为唯一的氮源,需要在培养基中加入酚红指示剂进行鉴定。若筛选纤维素分解菌,在选择培养后须进行[E]梯度稀释→[F]涂布平板→挑选产生透明圈的菌落。
答案:(1)灭菌 倒平板 倒平板
(2)稀释涂布平板法 平板划线法
(3)氮源 酚红 梯度稀释 涂布平板 透明圈
2.(2016·宁夏银川三模)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:
(1)微生物培养操作过程中,为了防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”),操作者双手要进行清洗和________。除巴氏消毒外,还有________和化学药剂消毒。
(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,选择的涂布工具称为________,为防止杂菌污染,该工具应浸泡于酒精中,涂布前应________。
(3)图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值________(填“偏大”或“偏小”),原因是_________________________________________________。
解析:(1)消毒指使用较温和的物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。故防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行灭菌,操作者双手要进行清洗和消毒。常用消毒方法有:巴氏消毒法、煮沸消毒法和化学药剂消毒法。
(2)稀释涂布平板法中的涂布工具称为涂布器。为防止杂菌污染,该工具应浸泡于酒精中,涂布前应将涂布器引燃(灼烧),消灭杂菌,待冷却后使用,避免高温杀死菌种。
(3)每个细菌在培养基培养可以形成一个菌落,3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,取平均值,得到生牛奶中每毫升含细菌数为34÷0.1×104=3.4×106个。因为进行菌落计数时,两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算,故统计的结果往往较实际值偏小。
答案:(1)灭菌 消毒 煮沸消毒
(2)涂布器 将涂布器引燃(灼烧)后待冷却
(3)3.4×106 偏小 当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算
3.如表所示是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列问题:成分 含量 蛋白胨 10.0 g 乳糖 5.0 g 蔗糖 5.0 g K2HOP4 2.0 g 显色剂(伊红美蓝) 0.2 g 琼脂 12.0 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL (1)大肠杆菌的同化类型为________,从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于________。
(2)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是________________,因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”),操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使________________,还能破坏DNA的结构。
(3)根据用途划分,该培养基属于________(填
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