2016届二轮复习微生物的利用 专题卷.docVIP

A组　基础巩固 1.(2015·四川遂宁零诊考试)下表是某同学列出的分离土壤中微 培养基配方 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后用蒸馏水定溶到1 000 mL (1)从作用上看该培养基属于________培养基提供氮源的物质是________细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。 (2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时还需在培养基中加入________指示剂若指示剂变________说明有目的菌株存在。 (3)为了测定微生物的数量接种时应采用________法某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为10的土壤样液0.1 mL培养后菌落数分别为180、155、176、129个则每毫升原土壤样液中上述微生物的数________，测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。 解析　(1)题干指出下表是分离土壤中微生物的培养基的配方其中尿素是作为唯一氮源能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源所以该培养基从用途上属于选择培养基。细菌能利用该氮源是由于体内能合成脲酶。 (2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时还需在培养基中加入酚红指示剂若指示剂变红说明有目的菌株存在。 (3)纯化微生物可以用1毫升原土壤样液中上述微生物数量＝(180＋155＋176＋129)÷4×10＝1.6×10个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数但统计的数量比实际数量会偏少原因是当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落。 答案　(1)选择　尿素　脲(催化尿素分解的)　(2)酚红　红　(3)稀释涂布平板　1.6×10　低 (2015·北京海淀模拟)为获得果胶酶高产菌株科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。 (1)为分离果胶酶产生菌科研人员配制了下表所示成分的培养基该表空白处的两种成分是______________________________________________________。 制备的培养基常用________法进行灭菌。 (2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中震荡混匀制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落还需要将悬液进行________用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基________状态放入培养箱。 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂 0.1 g 0.5 g 3 g 0.01 g 2 g 15 g 加至1 L (3)选择单菌落数目适宜的培养基加入一定浓度的刚果红溶________直径的比值筛选果胶酶高产菌株。 (4)将获得的菌株进行液体培养后从培养液的________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时需将________与等量果胶溶液混合作为实验的对照。 解析　(1)由于 (2)为获得较均匀分布的单菌落还需要将悬液进行梯度稀释并用稀释涂布法接种于固体培养基上。接种后的培养基倒置状态放入培养箱防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染。 (3)选择单菌落数目适宜的培养基加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液观察并比较菌落和水解直径的比值筛选果胶酶高产菌株 (4)将获得的菌株进行液体培养后从培养液的上清液获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合作为实验的对照。 答案　(1)果胶和蒸馏水　高压蒸汽灭菌 (2)梯度稀释　(稀释)涂布　倒置 (3)水解(或“透明”) (4)上清液　等量失活的粗提果胶酶 (2014·荆门调研)从自然界微生物中养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件使其群落的数量大大增加从而分离出所需微生物的培养方法。 (1)接种前要对培养基进行__________处理。在整个微生物的分离和培养过程中一定要注意在__________条件下进行。 (2)不同微生物的生存环境不同获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从________环境中采集。 (3)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制________培养基该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的________。 (4)经过梯度稀释后要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上在该培养基中需要加入的特殊染料是____________当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时发现培养基上的菌落连