显微镜和脂肪鉴定.pptVIP

一、检测生物组织中的脂肪  1、实验原理： 苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。 2、实验材料 脂肪：选择富含脂肪的种子，如花生、蓖麻种子（实验前一般需浸泡3-4小时） 脂肪的检测和观察 方法一 向待测的组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察颜色变化。 方法二 取材 取浸泡过的花生种子，去掉种皮。 切片 用刀片将子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。 制装片 1.从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央； 2.在花生子叶片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3 min，（如用苏丹Ⅳ染液，染色1 min）； 3.用吸水纸吸去染液，滴1～2滴50%的酒精，洗去浮色； 4.用吸水纸吸去子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。 观察 在低倍镜下找到花生子叶的最薄处，移至视野中央，将影像调清楚，再转换高倍镜观察。 现象 脂肪小颗粒苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。 3、实验方法 镜筒 压片夹 载物台 遮光器与光圈 反光镜 镜座 镜柱 镜臂 细准焦螺旋 粗准焦螺旋 物镜 目镜 二、显微镜的结构： （一）取镜和安放 1．取镜： 手握住镜臂， 手托住镜座，轻拿轻放。 2．安放：把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处）。安装好 和 。 （二）对光 1．转动 ，使 倍物镜对准 (物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。 2．调整 ，把一个 的光圈对准通光孔。 眼注视目镜内(右眼睁开，便于以后同时画图)。转动 ，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，可以看到白亮的视野。 （三）用低倍镜观察 1．把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。 2．转动 准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜 （眼睛看着物镜，以免 ）。 3．左眼向目镜内看，同时 方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到 为止。再略微转动 准焦螺旋，使看到的物像更加 。 （四）用高倍镜观察 1、在低倍镜下把标本中需要放大的部分移到 。 2、转动转换器，使 倍物镜对准通光孔。 3、左眼向目镜内看，再稍微转动 准焦螺旋，看清物像。 （五）显微镜的收存 1、实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。 2、转动转换器， ，并把镜筒缓缓下降到最低处。 3、最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。 注意： 1）正确使用低倍镜：取镜——对光——安放装片——下降镜筒——调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。 2）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到清晰的物像移到视野中央——转动转换器，换用高倍物镜——调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜——调节细准焦螺旋，直至物像清晰。 脂肪的检测和观察 方法一 向待测的组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察颜色变化。 方法二 取材 取浸泡过的花生种子，去掉种皮。 切片 用刀片将子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。 制装片 1.从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央； 2.在花生子叶片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3 min，（如用苏丹Ⅳ染液，染色1 min）； 3.用吸水纸吸去染液，滴1～2滴50%的酒精，洗去浮色； 4.用吸水纸吸去子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。 观察 在低倍镜下找到花生子叶的最薄处，移至视野中央，将影像调清楚，再转换高倍镜观察。 现象 脂肪小颗粒苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。 生物组织中脂肪的鉴定 4、实验结果 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 ? 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 ? 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 ? 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 装片不宜