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显微镜基础知识 光学基础:安全: (图标含义,自身的保护) 注意 本标识提示某项说明需要特别注意。 警告 本标识提示可能对仪器或系统存在某种潜在的危害。 警告 本标识提示可能对使用者存在潜在的危害。 警告 注意高温表面。 警告 注意UV辐射。 警告 仪器在打开前需断开电源。 安全: 图标的含义 显微镜基础知识 光学基础:安全: (图标含义,自身的保护) 自身的保护: (UV辐射,烫伤,用电安全) UV光源对眼睛有很大的伤害,可以导致视网膜脱落,造成终身失明,因此调节的时候一定要注意保护眼睛,尽量通过调节工具来调节中心.另外非常强的可见光源依然会损伤眼睛,因此不要用眼睛直视光源部分.尽量通过保护屏来观察. HBO光源和HAL 100卤素灯光源的灯箱外壳和灯泡部分在使用时或刚刚关闭的时候不要用手接触,以免烫伤. HBO灯泡内含有汞蒸汽,因此使用时要小心 在拆卸显微镜的带电部分的时候,一定要将电源线拔下,彻底断电.以保护自身安全. 显微镜基础知识 光学基础:显微镜光路整体结构图 正置显微镜 PrimoStar AxioStar plus AxioSkop 40 Axio Scope A1 AxioImager 显微镜基础知识 光学基础:显微镜光路整体结构图 倒置显微镜 AxioObserver Axiovert 200 Axiovert 40 显微镜基础知识 光学基础:显微镜光路整体结构图 体视显微镜(解剖镜) Stemi DV4 Stemi 2000 Discovery V8 Discovery V12/20 Discovery Lumar 体式镜常用分辨率表示方式是：每mm能分辨的最多线数 =1000N.A/0.61 λ λ =0.55um 显微镜基础知识 BF 明场 采用透射光直接观察样本 (透射,反射) PH 相差 利用被检物体的光程（折射率 x 厚度）差进行镜检 DIC 微分干涉 通过特制的棱镜将偏振光分解和合成,增强光程差使得样品 -Plas DIC 呈现出立体图像 塑料微分干涉 FL 荧光 通过特定光源的照射,使得样品发出特定颜色的光 POL 偏光 通过偏镜和检偏镜,使用偏振光来观察样品 DF 暗场 利用丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增大 了人眼可见性 光学基础:常见观察模式 显微镜基础知识 BF 明场 应用领域： 常规镜检、病理、 染色标本 优点： 视野亮度高、均匀， 应用范围广， 操作简单，价格低， 物镜适用于荧光观察 缺点： 透明标本对比度低， 标本没有立体感 显微镜基础知识 PH 相差 优点： 鉴定活体细胞最实用、最经济的方法 缺点： 需要特殊的相差物镜(PH) 需要光强高 切片不能太厚(5~10um) 盖片、载片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜 显微镜基础知识 PH 相差 相差物镜 聚光镜内带相差环 PH 1/2/3(阿拉伯数字) 显微镜基础知识 DIC 微分干涉 显微镜基础知识 DIC 微分干涉 DIC物镜 聚光镜内带DIC棱镜 DICI/II/III (罗马数字) 检偏器 显微镜基础知识 DIC 微分干涉 检偏器 聚光镜内带DIC棱镜 DICI/II/III (罗马数字) DIC物镜 显微镜基础知识 FL 荧光 优点： 检出能力高（放大作用） 对细胞的刺激小（可以活体染色） 能进行多重染色 用途： 物体构造的观察——荧光素 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体荧光等 发荧光量的测定对物质定性、定量分析 显微镜基础知识 FL 荧光 荧光模块 荧光光源 显微镜基础知识 FL 荧光 荧光滤色块参数 例如: Filter set 02 shift free EX G 365, BS FT 395, EM LP 420 488002-9901-000 其中 EX 365 (BP 带通) BS 390 EM LP