基于X-harge柱的HPLC法测定卡巴胂原料药有关物质.docx

基于X-Charge色谱柱的HPLC法测定卡巴胂原料药含量和有关物质李姮1，耿颖2* (1.连云港市药品检验所,连云港222000；2.中国食品药品检定研究院， 北京 100050)摘要 目的：建立卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定的高效液相色谱方法。方法： 色谱柱为Acchrom Xcharge C18柱，流动相为0.1%三氟乙酸溶液-0.1%三氟乙酸乙腈溶液，梯度洗脱，流量1.0ml?min-1，检测波长254nm，柱温30℃。结果：该方法的专属性、准确度、精密度、线性、范围、检测限及定量限均可满足卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定的需要。结论：所建方法简便、准确，可用于卡巴胂原料药有关物质检查和含量测定。关键词：卡巴胂；有关物质；含量测定；高效液相色谱法 Determination of Assay and Related substances of drug substance of Carbarsone by X-Charge column-based HPLC methodsLi Heng1， Geng Ying2*(1. Lianyungang Institute for Drug Control, Lianyungang 222000； 2. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050)Abstract Objective： To establish an HPLC method for the determination of assay and related substances of drug substance of carbarsone．Methods： The analysis was performed by HPLC with Acchrom X-charge C18 column and a gradient elution of mobile phase of 0.1% trifluoroacetic acid solution and 0.1% trifluoroacetic acid acetonitrile solution, a flow rate at 1.0 ml?min-1, the detection wavelength as 254 nm and column temperature as 30℃．Results: The specificity, accuracy, precision, linearity, range, limit of detection and limit of quantitation met the methodology requirements on assay and related substances of drug substance of carbarsone. Conclusion：The method is simple and accurate which can be used for the determination of related substances and assay of drug substance of carbarsone. Key words：Carbarsone; related substance; assay; HPLC method卡巴胂为有机胂酸类药物，早期应用于抗丝虫病和阿米巴痢疾，直到1991年，被联合国用于阿米巴痢疾的治疗。之后，FDA批准其作为兽药继续使用[1-2]。卡巴胂现行质量标准收载于1996年《卫生部药品标准》[3] 含量测定采用消化后的溴酸钾滴定法，《美国药典》20版中卡巴胂[4] 含量测定项下采用消化后的碘量法进行含量测定，两种方法均是将有机胂消化为无机砷盐后，采用氧化还原滴定法进行测定。由于卡巴胂标准陈旧，缺乏有关物质控制，经查阅文献，未见相关的有关物质检查方法研究报道。 为快速、准确地测定卡巴胂原料药，本文采用XCharge色谱柱[5]，建立了HPLC含量测定和有关物质检查方法。1 仪器与试药岛津LC-10AVP高效液相色谱仪（包括Lab Solution工作站）；Metter XP205电子天平（梅特勒-托利多国际股份有限公司）。卡巴胂对照品（USP，Catalog Number:1093205，含量100.0%）；卡巴胂原料药（无锡百翱得生物科学有限公司提供，批号200901,200902）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为一级去离子水（18.2M?）。2 方法验证与结果2.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱为Acchrom X-Charge C18（4.6