第十二章色谱法解说.ppt

固定相和流动相: 固定相是相对于仪器位置固定不动的一相， 流动相是相对于固定相不断运动的一相， 两相一定要有相对运动，且互不相溶， 固定相和流动相为色谱分离中的样品提供了一个存在的空间。 分离原理: 不同的物质在互不相溶的两相中，具有不同的分配系数，当两相做相对移动时，物质就会在两相间进行反复多次的分配，从而在移动速度上产生差异，最后使得各组分得以分离。 二．色谱法的分类 5.保留值： 表示色谱峰在色谱图中的位置 是组分在色谱柱中的滞留时间。 反映了组分分子与固定相分子之间作用力的大小。 通常用时间、体积或距离来表示。 ①保留时间tR 从进样开始到色谱峰极大值出现时所需要的时间。 该组分通过色谱柱所需要的时间（组分在柱内运行的时间）。 组分在柱内的滞留时间就是组分在固定相和流动相中滞留时间 的总和。 ②死时间t0 不被固定相保留的组分，从进样开始到出现极大值所需时间。对于气相色谱，死时间指从进样到空气峰（对热导检测器）或甲烷峰（对氢焰检测器）最高点所经过的时间。 几种说法： 不被固定相保留组分的保留时间； 流动相通过色谱柱所需时间； 组分在流动相中所滞留的时间； 流动相充满柱内空隙体积时所消耗时间。 同一样品中的所有组分的死时间都相同。 设一色谱柱的柱长为L（㎝），ū为流动相平均线速度（㎝/s）， 那么死时间t0可由t0=L/ū来求得。 ③调整保留时间tR 是组分在固定相上的滞留时间。tR=tR－t0 组分的保留时间实际上包括两部分： 一是组分在固定相中的滞留时间（组分被固定相滞留所消耗的时间），即tR 一是组分在柱内流动相所占空间内运行所消耗的时间，也就是组分在流动相中滞留时间，即t0， ∴tR反映了组分与固定相之间的相互作用，t0反映了流动相在柱内所占体积大小，它与组分性质无关。 从色谱流出曲线中，可得许多重要信息： (i) 色谱峰的个数。可以判断样品中所含组分的 最 少个数。 (ii) 色谱峰的保留值。可以进行定性分析。 (iii) 色谱峰的面积或峰高。可以进行定量分析。 (iv)色谱峰的区域宽度。评价色谱柱分离效能的依据。 (v) 色谱峰两峰间的距离。评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。 四、分配平衡 在一定温度下，组分在流动相和固定相之间所达到的平衡叫分配平衡，组分在两相中的分配行为常采用分配系数K和分配比k来表示。 2、分配比k’(又叫容量因子，容量比) 组分在固定相中的质量 组分在流动相中的质量 = ms/ mm =?svs/ ?mvm =K vs/vm ①假设色谱柱是由一系列连续的、相等体积的塔板组成，每一块塔板的高度叫做理论塔板高度，用H来表示。 例题： 在1.0m长的色谱柱上，测得组分A和非滞留组分的保留时间分别为8.40min和1.60min，组分A的峰底宽度为4.5mm，记录纸的速度为300mm·h-1，计算该柱的有效理论塔板高度。 解：根据题义：tR=8.40min，t0=1.60min， 峰底宽度wb=(4.5/300)×60=0.90min 那么，neff=16(tR/wb)2 =16[(tR–tM)/wb]2 =16[(8.40–1.60)/0.90]2 =913 那么，Heff=L/neff=1000/913=1.1mm 二、速率理论(Van Deemteer 方程式) 吸收了塔板理论的有效成果——H； 从动力学角度较好地解释了影响柱效的因素。 气-液色谱速率理论方程的具体表达式： 又叫分辨率、分辨度、总分离效能指标。用R表示，它是 色谱图中两相邻组分峰的分离程度的量度，相邻两组分色 谱峰保留值 之差与两组分色谱峰峰底宽度平均值之比。 例题： 在长为3.0m色谱柱上，分离组分x、y时的色谱图如下： 试计算： ①柱的分离度； ②柱的平均理论塔板数； ③理论塔板高度； ④组分x、y达刚好完全分离时所需柱长。 第三节 气相色谱法 （一）气路系统—载气连续运行的密闭管路系统 1. 对气路的要求： 2. 气路结构 3. 流速的测定和校正 载气流速采用 双柱双气路分两路进入各自的色谱柱和检测器，其中一路作