基于负载HRP的介孔二氧化硅粒子的EMFET生物传感器.pdfVIP

C01．14 第14卷专辑 中 国粉体技术 Suppl 2008 2008年6月 ChinaPowderScienceand June Technology 朱以华，王平，杨晓玲 (华东理工大学超细材料制备与应用教育部重点实验室，上海200237) 摘要：基于负载辣根过氧化氢酶(HAP)的介孔二氧化硅(US)粒子的酶场效应晶体管(D酮盯)用来检测过氧化氢浓度的生物 传感器已经被制得。不同孔径的MS粒子被用作固定酶的载体构造ENFET。MS粒子显著改善了酶的固定量。用负载HRP的 不同孔径的MS粒子研究，发现扩孔的MS粒子的性能更好，同时还讨论了缓冲液浓度和pH值的影响。另外，由于在MS粒子 表面组装了5个复层的聚电解质。生物传感器的稳定性良好。 关键词：介孔二氧化硅；辣根过氧化氢酶；酶场效应管；生物传感器 介孔二氧化硅(MS)是一类比表面积很大、孔径离子敏场效应管(姗)表面，制成ENFET生物传 在2。50砌范围内的多孔材料[1】1。由于其孔径与 感器，则具有操作简单，响应速度快，灵敏度高等优 酶的直径接近，可用作固定化酶的载体，因而近年来 势。 激起了人们广泛的研究兴趣[2-5】。目前MS作为酶 l 实验部分 载体主要存在两个问题：一是常用的介tL--氧化硅 am)，只 材料，如MCM一41孔径较小(典型的为2—8 1．1化学试剂 能在孔中固定相对小尺寸的酶，而且载酶量低，载酶 Ⅷ讲(148U／mg)购于Sigma公司；聚二烯丙基二 速率慢【2】2。最近报道的SBA一15的介孔硅材料虽 甲基胺盐酸盐(PDDA)(分子量约20000)和聚苯乙 然有较大的孔径(5—15am)，可提高载酶量【4J，但是烯磺酸钠(Ps：s)(分子量约20ooo)购于Aldrich公司； 孔中靠物理吸附的酶在使用中容易脱落，这也是MS 其他化学试剂均为分析纯，实验所用水为二次蒸馏 材料用作酶载体存在的第二个大问题[6】6。 水。 为了提高载酶量，最近我们报道了MS球形粒 1．2 MS粒子的制备 子的制备和扩孔工艺，可将3．2nln左右的孔径扩大 MS粒子的合成参照我们以前报道的文 到平均孔径为9．7nm[7I。这有利于装载较大尺寸的 献[7。10]，具体的过程为：将1 g十六胺作为表面活性 酶，并提高载酶量。我们已用这种扩孔的MS粒子 装载了葡萄糖氧化酶(GOx)[8】、香精分子[9]和原位 mL正硅酸 (28％)的均相混合溶液中，然后加入12 合成了量子点【10]。同时对№粒子表面逐层组装多 乙脂，搅拌过夜。生成的固体粒子过滤、洗涤、干燥， 层聚电解质可有效防止装载物的脱落[9]9。本文中主 最后600 oC焙烧6h，得到介孔二氧化硅粒子。为了 要报道采用这种球形MS粒子