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第八章 吸光光度法 第一节 吸光光度法基本原理 第二节 光度计及其基本部件 第三节 显色反应及显色条件的选择 第四节 吸光度测量条件的选择 第五节 吸光光度法的应用 第六节 紫外吸收光谱法简介 概述 吸光光度法(Absorption Photometry)是一种基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。包括可见吸光光度法、紫外吸光光度法和红外光谱法等。 吸光光度法同滴定分析法、重量分析法相比,有以下一些特点: (一)灵敏度高 吸光光度法测定物质的浓度下限(最低浓度)一般可达10-5的微量组分。对固体试样一般可测到10-4。如果对被测组分事先加以富集,灵敏度还可以提高1-2个数量级。 续前 (二)准确度较高 一般吸光光度法的相对误差为 2-5%,其准确度虽不如滴定分析法及重量法,但对微 量成分来说,还是比较满意的,因为在这种情况下, 滴定分析法和重量法也不够准确了,甚至无法进行测 定。 (三)操作简便,测定速度快 (四)应用广泛 几乎所有的无机离子和有机化合物 都可直接或间接地用吸光光度法进行测定。 吸光分析的几种方法 分光光度法(紫外-可见分光光度法)UV-VIS 第一节 吸光光度法基本原理 一、物质对光的选择性吸收 二、光的吸收基本定律——朗伯-比尔定律 三、偏离比尔定律的原因 一、物质对光的选择性吸收 1. 光是一种电磁波 不同波长的光具有不同的能量 E=h? = h c/? 人眼只能感受到可见光区域的光,只占整个电磁波谱中很小的一部分。波长范围在400 ~760 nm。不同波长的可见光引起人不同的视觉效果,因而产生不同的颜色。 续前 2. 互补色光 如果将两种适当颜色的可见光按一定比例混合能 得到白色光,则具有此性质的两种光称为互补色光。 单色光、复合光、光的互补 3. 吸光条件 续前 续前 4 吸收曲线与最大吸收波长 吸收曲线的讨论: 续前 二、 光的吸收基本定律——朗伯-比尔定律 透光度 当一束强度为I0的平行单色光通过任何均匀的非散射溶液时,一部分光被介质中的吸光分子吸收,另一部分光透过溶液后,强度降低为It ,It与I0之比称为透光度 T= It / I0 溶液的透光度愈大,表示它对光的吸收愈小;相反,透光度愈小,表示它对光的吸收愈大。 吸光度 物质对光的吸收程度用吸光度表示 A = lg(1/T)= lg(I0/It) 续前 1. 具体内容 2. 数学表达式 3. 适用范围 此定律不仅适用于溶液,也适用于其它均匀非散 射的吸光物质(气体或固体),是各类吸光光度法定 量分析的依据。 4. 摩尔吸收系数κ的意义 续前 5. κ 与 a 的关系 6. 吸光度的加和性 三、偏离朗伯-比耳定律的原因 标准曲线与吸收光谱的关系 1. 物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 续前 讨论: 讨论 2. 化学性因素 第二节 光度计及其基本部件 一、 光源 二、 单色器 光栅 三、吸收池 四、 检测系统 (2)光电二极管阵列 五、 显示器 把检测器输出的信号以适当方式显 示或记录下来。 分光光度计常用的指示器有检流计、微安表、数 字显示器等。 第三节 显色反应与显色条件的选择 一、显色反应的选择 二、显色条件的选择 三、显色剂 四、三元配合物在光度分析中的应用特性简介 一、显色反应的选择 续前 二、 显色条件的选择 续前 2. 酸度 具体的实验方法 3. 显色时间与显色反应温度 同显色剂用量的确定方法 4. 干扰的消除 三、 显色剂 四、三元配合物在光度分析中的应用简介 第四节 吸光度测量条件的选择 一、入射光波长的选择 二、参比溶液的选择 三、吸光度读数范围的选择 一、入射光波长的选择 续前 二、 参比溶液的选择 选择参比溶液所遵循的一般原则 续前 参比液的选择 三、 吸光度读数范围的选择 续前 续前 第五节 吸光光度法的应用 一、普通分光光度法 二、高含量组分的测定──示差法 三、光度滴定 四、配合物组成的测定——摩尔比法 一、 普通分光光度法 2. 多组分的同时测定 ⑵ 各组分的吸收曲线互有重叠 续前 二、高含量组分的测定──示差法 续前 示差法为什么能较准确地测定高浓度组分呢? 续前 续前 示差法的浓度相对误差: 续前 三、 光度滴定 四、配合物组成及稳定常数的测定 摩尔比法 续前 2. 配合物稳定常数 K稳 的测定 平衡浓度如何求? [ML]如何求? 第六节 紫外吸收光谱法简介 一、有机化合物电子跃迁的类型 跃迁:需能量较高,相当于真空紫外光。饱和烃的 C-C 键和
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