血液促凝剂质量控制及质量体系建立.ppt

血液促凝剂质量控制方法及质量控制体系的建立 撰稿及主讲人： 白 原西安第四军医大学 唐都医院检验科 前 言 　 血液促凝剂是生产真空采血管促凝管的核心原料，使用量大，技术要求高。对所制成的分离胶-促凝管的技术性能影响甚为关键，其技术水平代表了企业在真空采血管产品领域的真实技术水平。国内采血管企业的技术竞争主要还是促凝剂的好与坏的竞争，使用了好的促凝剂，产品的竞争力就会显著提高。 血液促凝剂，国内大多采用普通硅石粉制成，促凝效率较低，一般凝血时间在15 分钟左右，凝固后还需放置20分钟左右时间才能上机离心，离心时间也比较长，一般需要8--10分钟，即使这样仍然含有干扰吸样的纤维蛋白。在计量的掌握方面要求严格，浓度过高易造成溶血。 目前，全国采血器的生产厂家所采用的促凝剂配方非常混乱，但是归纳总结起来无外乎生物型和无机型两种类型，或者两种类型混合。生物型的主要成分为凝血致活酶和兔脑粉。 凝血酶的缺点是具有所有酶的特征，不好保存，受诸多因素影响容易失活。尤其在冬季受温度影响很大，温度低则活性降低，凝血时间自然也就延长。 兔脑粉虽然凝血速度快，但是仍然受温度制约，凝血酶和兔脑粉的凝血原理由于是以血浆先凝固然后带动血球凝固的，血块凝集是通过纤维蛋白网罗血细胞而实现的。因此血块收缩不是十分理想，离心后血球仍然是以松散流动的形式存在的。 无机型的主要成分是：高岭土、石英粉、硅藻土、硅石粉、玻璃粉等。起作用的主要是所含成分二氧化硅 二氧化硅的含量在不同的产品中是不同的，因此，凝集活性自然也有差别。无机型的缺点是凝血速度慢，还有纤维蛋白会二次析出的弊病 。 二氧化硅的作用是激活机体的内、外凝血系统，启动瀑布式凝血反应。作用于血小板第Ⅺ、Ⅻ因子。但是，无机型的缺点是凝血时间较有机型的长，压纤维蛋白的功能较弱。完成这个过程需要一定的时间和温度，也不可能在短时间内完成凝血的全过程。各个厂家的配方也参差不齐，凝血效果则有好有坏。总而言之，包括国外的知名品牌在内，还未达到理想的状态。 用以下技术指标综合评价促凝剂的优劣：1、凝血时间长短。2、放置时间与上机离心的时间。3、有无明显的纤维蛋白（即影响吸样针吸样的程度）。4、管壁清洁程度。5、分离胶的清洁程度（分离胶内夹带血丝少，分离胶离心后应呈白色）。6、血清的清析度如何。7、受温度影响的大小。8、是否达到100%的一次离心成功率。9、有无完善的质量控制体系，特别是不须采用抽血验证的方法科学、客观、准确的评价促凝剂的优劣。 本产品的原理如下：配方主要成分之一PHA 凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。 植物血凝素是一种具有胶凝性特点的蛋白质，它与血液中的抗原会发生化学反应引起红血球的聚集。本促凝剂是个综合性的配方，PHA的提取工艺是关键技术，由于传统的提取技术比较复杂，并且主要用于制药工业，没有适合促凝剂方面的专用提取技术，通过我自创的独特提取工艺保证了产品的稳定性和持久性，达到了采血管工艺所需要的技术指标。 耐高温实验：将噴有促凝剂的试管放置在55℃±2℃的水浴箱内2小时，然后抽血实验验证是否对凝血效果有影响。并采用96孔国际标准血凝板和显微镜凝集法实验验证对血凝的影响。 低温实验：将噴有促凝剂的试管与对照管预先放在冰箱内30分钟预冷。然后抽血混匀后存放在2-4℃的冰箱内20分钟取出，3500转/分离心5分钟，验证凝血效果。并采用显微镜凝集法实验验证对血凝的影响。 纠正一个认识误区 现在，无论是医院还是采血管企业，对于促凝剂的评价都是追求凝血时间的快与慢，似乎凝血时间越快越好。实际上这是一个认识上的误区，必须要纠正，下面我从理论上来加以阐述： 众所周知，血液的凝固是需要13种凝血因子相继激活，以最后纤维蛋白元转化为纤维蛋白网罗血细胞而实现血液凝固的。完成这个过程是需要花费一定时间的，加入促凝剂仅仅是为血液凝固提供血液凝固所需要的材料，而不能提前加快凝血时间与速度。加入凝血酶或兔脑粉后血液能在短期内凝固是一种假象，实际是血浆凝固而带动血球凝固了，真正意义上的血液凝集的发生应该是血球发生充分的凝固才行。而完成这个过程需要花费6--10分钟的时间，在这个过程中，纤维蛋白被充分的消耗。 在工厂里，生产含促凝剂的采血管都要进行试管的前期硅化与烘干处理，喷完促凝剂以后还要烘干。浪费时间、工时、电力。为了解决以上这些问题，本促凝剂已经成功的实现了试管不需事前进行硅化与烘干处理。只需要将本促凝剂喷入试管内就可以了，不需进行烘干处理。使用效果与烘干处理的无差别。 现在，对于促凝剂促凝效果的评价都是以健康人为标准的。对于健康人来讲由于不存在凝血因子的缺乏，