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素能演练提升(十七) 生物技术实践
(满分:100分 时间:45分钟)
1.(10分)(2015江苏,31)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题。
(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 (填序号)。?
酒精灯 培养皿 显微镜 无菌水
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是?
。?
(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是 。?
(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见上图)。图中降解圈大小与纤维素酶的 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。?
(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵,理由是 ?
。?
解析:本题考查微生物的培养。
(1)在样品稀释过程中需用到无菌水,涂布平板时需酒精灯、培养皿,都不需显微镜。
(2)筛选纤维素酶高产菌,采用稀释涂布法时菌液不宜过多,否则菌体堆积,无法获得单菌落,影响分离效果。
(3)分装培养基时,若试管口粘附有培养基,盖棉塞时会粘附于棉塞上,易受到空气中微生物的污染,进而造成培养基污染。
(4)纤维素与刚果红结合形成红色复合物,当纤维素酶高产菌分泌纤维素酶降解纤维素后,红色消失,从而使菌落周围出现透明圈。产生纤维素酶越多,活性越强,则分解的纤维素越多,产生的透明圈越大。据此可以看出,图中菌落透明圈最大,降解纤维素能力最强。
(5)发酵过程,微生物细胞呼吸产热,温度较高并产生酸性物质如CO2或乳酸使pH降低。因此,耐高温、耐酸的菌株更适合用于人工瘤胃发酵。
答案:(除注明外,每空1分)(1)
(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果(2分)
(3)避免培养基污染棉塞
(4)量与活性(2分)
(5)J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高(2分)
图1
2.(7分)(2015江苏南京5月调研)研究酶的化学性质和作用机理,有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践。请回答下列问题。
(1)甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是 。?
(2)在实际生产中,固定化细胞技术实质上固定的是 。制备固定化酵母细胞时,常用的方法是图2中[ ] (填数字序号及名称)。?
图2
(3)在生活实践中,酶制剂在洗衣粉中被广泛应用。某研究性学习小组为探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最适温度,设计了如下装置进行实验,并将结果用曲线图A、B表示(如图3)。
图3
使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为 。?
在0 和75 时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45 时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为 。?
(4)在现代生物工程中,可用酶在体外处理“蛋白质—DNA复合体”以获得包裹在蛋白质中的DNA片段信息,过程如图4所示。
图4
a、b过程中,酶作用的部位依次是 。?
若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增,与细胞内的DNA复制过程相比,利用PCR技术扩增DNA时所需酶的不同之处是 。?
解析:(1)分析曲线可知,用同一种蛋白酶处理后,甲酶活性不变,乙酶活性下降,说明乙酶的成分是蛋白质,甲酶的成分是RNA。
(2)固定化细胞技术实质上固定的是细胞内的一系列酶或多种酶;制备固定化酵母细胞时,常用的方法是包埋法。图中是连接法,是吸附法,是包埋法。
(3)由图3可知,45 时洗衣粉中酶的催化效率最高,说明该加酶洗衣粉的最适宜温度为45 。
在0 和75 时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45 时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为高温条件下酶的结构已遭到破坏,酶的活性已丧失。
(4)由图4可知,DNA酶能催化DNA水解,催化的是磷酸二酯键;蛋白酶能催化蛋白质水解,催化的是肽键。
与细胞内的DNA复制过程相比,PCR技术扩增DNA时所需的酶是耐高温的DNA聚合酶,同时不需要DNA解旋酶。
答案:(每空1分)(1)RNA (2)多酶系统(一系列酶或多种酶) 包埋法 (3)45 ℃ 高温条件下酶的结构已
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