廖-第三章酶2017-2.ppt

临床诊断部分常用酶 酶 主要临床应用 谷丙转氨酶 肝实质疾患 谷草转氨酶 心肌梗塞、肝实质疾患 胆碱酯酶 有机磷中毒 乳酸脱氢酶 心肌疾患、肝实质疾患 淀粉酶 胰腺疾病 碱性磷酸酶 骨病、肝胆疾患 胰蛋白酶(原) 胰腺疾病 肌酸激酶 心肌梗塞、肌肉疾患 醛缩酶 肌肉疾病 酸性磷酸酶 前列腺癌、骨病 γ谷氨酰转移酶 肝实质病变、酒精中毒 2. 酶与疾病的诊断 血清酶活性测定用于临床疾病诊断。 酶作为试剂用于临床检验和科学研究。 3. 酶与疾病的治疗 一些酶可以作为药物直接用于临床疾病治疗： 消化不良：胃酶、胰酶 预防血栓形成：尿激酶、链激酶、纤溶酶 许多酶也作为疾病治疗和药物设计的靶点： 如：磺胺药以二氢叶酸合成酶为作用靶点 …… 在代谢调节上起着重要的作用； 用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征； * 如延胡索酸酶仅催化反丁烯二酸(即延胡索酸)水化为苹果酸，而对顺丁烯二酸(马来酸)则无作用。 当底物浓度很低（[S]Km）时，V=Vmax/Km*[S]，反应速度与底物浓度呈正比。 当底物浓度很高（[S]Km）时，V≌Vmax，反应速度达最大速度，再增加底物浓度也不再影响反应速度。 温度升高至60°C 以上时，大多数酶开始变性；升高至80°C 时，多数酶的变性己不可逆转。 酶的最适温度不是酶的特征性常数，它与反应进行的时间有关（酶可以在短时间内耐受较高的温度，相反，延长反应时间，最适温度便降低）。人体内酶的最适温度多在35~40°C 之间。 不同的酶达到最大反应速率时的PH不一样，测酶活时选择最适PH，因为溶液的PH易受影响所以反应时用缓冲液。酶的活性中心必须基团、底物的一些基团、辅酶的一些基团在不同PH解离程度。在最适PH时，最最适合酶和底物结合，PH决定酶活性中心、底物、、辅酶的一些基团的解离程度。 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性 从不同角度来看酶的调节来影响体内代谢 因此，变构剂或底物浓度，在一定范围内一个比较小的变化就会导致反应速度显著的改变，故更具可调节性。 由于诱导剂在诱导酶生物合成过程的转录后，还需要翻译和翻译后加工等过程，所以其效应出现较迟，一般需几小时以上才能见效，因此酶的诱导与阻遏作用是对代谢缓慢而长效的调节。 酶的测定有助于对许多疾病的诊断。组织细胞受到损伤后，细胞内的酶则可释放入血，因此血清酶活性的检测对于一些疾病的诊断具有更重要的价值。 六、抑制剂对反应速度的影响 酶的抑制剂( inhibitor/I ) —使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质。 不可逆抑制 可逆抑制 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 抑制的类型： （1）不可逆抑制 抑制剂通常以共价键与酶蛋白活性中心上的必需基团结合，使酶活性消失。 不能用透析、超滤方法去除抑制剂。 实例1：有机磷农药中毒 机制：有机磷抑制胆碱酯酶（与酶分子上的羟基结合）→酶失活→乙酰胆碱积蓄→中毒。 解毒：可用解磷定解毒 实例2：重金属离子/路易士气中毒 机制：重金属离子和路易士气抑制巯基酶，与酶分子的巯基结合。 解毒：可用二巯基丙醇解毒。 路易士气 失活的酶 巯基酶 失活的酶 酸 二巯基丙醇 巯基酶 中毒 解毒 （二） 可逆性抑制剂与酶非共价结合 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 类型 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或消失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制剂 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶与底物形成中间产物 ，这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 定义 + + + E S I ES EI P E E K2 K1 K3 动力学特点 Vmax不变，Km增大 + I EI E + S E + P ES I S Ki 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 COOH COOH CH 2 丙二酸 琥珀酸 磺胺类药物对细菌FH2合成酶的抑制——与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋