细胞生物学综合性实验实验目的掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备.ppt

细胞生物学综合性实验 动物骨髓细胞染色体标本的制备及NOR的观察 骨髓细胞具有丰富的细胞质和高度分裂能力，可直接观察到分裂细胞，是研究动物细胞遗传学的好材料。 细胞生物学综合性实验 实验目的 掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备技术 观察染色体的数目以及形态特征 熟悉银染法显示动物细胞NOR的原理和方法，并了解NOR在细胞中分布情况 实验原理 经秋水仙素处理后，分裂的骨髓细胞被阻断在有丝分裂中期，再经离心、低渗、固定、滴片等步骤，便可制作出理想的染色体标本。 银染法可以显示中期染色体上的核仁组织区（NOR）。当NOR在间期转录时，产生一种与转录活动有关的酸性蛋白，此蛋白可保留至中期并能将染液中的银离子还原为金属银而显现为黑色。所以银染法可在中期染色体上显示具有转录活性的NOR数目。而且，染色的深黑程度，还可以反应出基因的活性高低。 实验材料 小白鼠或青蛙 实验仪器、用具 天平 离心机 温箱（或水浴锅） 显微镜 酒精灯 注射器（1ml） 解剖盘 解剖剪 刀片 离心管 吸管 烧杯 冰冻载玻片 试剂1 Carnoy固定液（现用现配） 甲醇：冰醋酸=3：1 生理盐水 0.1%秋水仙素溶液 用生理盐水配制 1/15 mol/L磷酸缓冲液（pH7.4） Giemsa染液 试剂2 50%硝酸银溶液 氨银溶液： 4g硝酸银溶于5ml蒸馏水，再加入5ml浓氨水 3%甲醛溶液：3ml