高中生物选修三基因工程题库.pptVIP

平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 。 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端 能带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 标记基因的作用鉴别受体细胞中是否含目的基因。如将来可用含青霉素的培养基鉴别，将含目的基因的细胞筛选出来。 PCR技术—聚合酶链式反应 ①概念： ②原理： ③前提： PCR扩增仪 DNA双链复制的基本原理 一段已知的目的基因的核苷酸序列 是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 四种脱氧核苷酸 一对引物 热稳定DNA聚合酶(Taq酶） 模板DNA (含有目的基因) 温度控制 ④条件： ⑤方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 环的次数） ⑥结果： 目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 指数 2n ⑦过程： a、DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板 在热作用下，_____断裂，形成___________ b、退火（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引 物与DNA模板结合，形成局部________。 c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从 引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补 的________。 氢键 单链DNA 双链 DNA链 复制原点+启动子+目的基因+终止子+标记基因 重组（基因表达）载体的结构组成 启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来 限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫基因) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 转基因棉花植株 基因工程操作的四个基本步骤 1）目的基因的获取 2）基因表达载体的构建 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和鉴定 基础理论和技术的发展催生了基因工程 DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译 基因转移载体的发现 工具酶的发现 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明 基础理论 技术发明 §1-1DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的概念 基因工程是指按照 ，进行严格的设计，并通过 和 技术，赋予生物以新的 ，从而创造出更符合人们需要的新的 和 。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 获取基因—体外重组—导入基因—表达基因 人类需要的新的生物类型和生物产品 人们的意愿 DNA重组 转基因 遗传特性 生物类型 生物产品 二、DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 载体——“分子运输车” 识别某种双链DNA分子特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化而来 1、来源： 2、作用： 3、特点： 4、结果： 片段的末端的形式 黏性末端 平末端 (一）限制性核酸内切酶（限制酶）---“分子手术刀” 特异性----特定序列、特定位点 形成DNA的双链片段 （二） DNA连接酶---“分子缝合针” 1、种类： 2、作用部位： 两类 E·coli DNA连接酶:连接黏性末端 T4 DNA连接酶 ：连接黏性末端和平末端 磷酸二酯键 2、运载体必须具备的条件： （1）具有一个或多个限制酶切点，以便与目的基因连接； （2） 能够在受体细胞中复制并稳定地保