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2014届高三生物创新方案(人教版)一轮复习课件 选修1 第五讲 DNA和蛋白质技术.ppt
答案:(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)DNA断裂 (3)①等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性,使DNA降解速度减慢 (4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分 混和。静置一段时间,吸取上清液 “课时达标检测”见“限时集训(四十六)” 高考地位 本部分内容在近几年高中命题中较少出现,但考查频率有升高的趋势,多在非选择题的题肢中考查 命题角度 以填空的形式考查PCR技术的原理、过程、条件,如典例3。 [典例3] PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答: (1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是________。 A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C.该过程不需要解旋酶的作用 D.该过程与人体细胞的过程完全相同 (2)C过程要用到的酶是耐高温的________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以______________ 加入,________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有:_________________________。 (3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“94℃~55℃~72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。 [解析] (1)高温所起的作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链。(2)C过程是PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。这种DNA聚合酶在高温下不变性,所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。 [答案] (1)C (2)DNA聚合酶 一次 不需要 DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸,通过控制温度使DNA复制在体外反复进行 (3)25% 血红蛋白的提取和分离 1.(2011·广东卷T5AB)猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂。 ( ) 2.(2011·广东卷T5CD) 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测,在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢。 ( ) √ × 3.(2009·江苏卷T23D)蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化。 ( ) 4.(2011·山东卷T34(3))电泳法纯化蛋白质时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其相对分子质量越大,电泳速度越快。 ( ) 5.(2010·江苏卷T3C)利用透析法纯化蛋白酶时,应以蒸馏水作为透析液。 ( ) √ × × 1.方法及原理 方法 原 理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同 2.实验操作程序 (1)样品处理: ①红细胞的洗涤:除去血浆蛋白等杂质,有利于后续步骤的分离纯化; ②血红蛋白的释放:使红细胞破裂,血红蛋白释放出来; ③分离血红蛋白溶液:经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来,便于下一步对血红蛋白的纯化。 (2)粗分离: ①原理:透析袋能使小分子自由出入,而将大分子保留在袋内,透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质。 ②过程:取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有300 mL的物质的量
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