6.3-4高效液相色谱的固定相及色谱分离方法选择.ppt-学院精品课程网.ppt
《仪器分析》精品课程 《仪器分析》精品课程 6.3 高效液相色谱的固定相 和流动相 一、液固吸附色谱 二、液液分配色谱 三、化学键合色谱 四、凝胶色谱 五、离子交换色谱 一、液固吸附色谱 1. 固定相 液固吸附色谱的固定相是固体吸附剂,是一些多孔的固体颗粒物质。 液固色谱法采用的固体吸附剂按其性质可分为极性和非极性两种类型。极性吸附剂包括硅胶、氧化铝、氧化镁、硅酸镁、分子筛及聚酰胺等。非极性吸附剂最常见的是活性炭。 极性吸附剂可进一步分为酸性吸附剂和碱性吸附剂。酸性吸附剂适于分离碱,碱性吸附剂则适于分离酸性溶质。 各种吸附剂中,最常用的吸附剂是硅胶,其次是氧化铝。在现代液相色谱中,硅胶不仅作为液固吸附色谱固定相,还可作为液液分配色谱的载体和键合相色谱填料的基体。 2.流动相 液相色谱的流动相必须符合下列要求: 应与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性; 应有高纯度; 性能应与所使用的检测器相匹配; 应对样品有足够的溶解能力; 应具有低粘度和适当低的沸点; 毒性小,不易着火、价格尽量便宜等。 在液-固色谱中,选择流动相的基本原则是 极性大的试样用极性较强的流动相,极性小的则用低极性流动相。 为了获得合适的溶剂极性,常采用两种、三种或更多种不同极性的溶剂混合起来使用,如果样品组分的分配比k值范围很广则使用梯度洗脱。
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