3.2《体外受精和早期胚胎培养》规范.ppt

* . . . * . . . * . . . * . . . * . . . 专题3 胚胎工程 课题2 体外受精和早期胚胎培养 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤； 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法； 3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 以试管婴儿为背景材料，设计问题，导入新课；首先直接阐明试管动物技术的概念，以“试管牛”为例讲解试管动物技术过程；接着讲解体外受精技术，卵母细胞的采集和培养，精子的收集和获能；然后讲解胚胎的早期培养，比较试管动物和克隆动物的区别；最后通过课堂总结及课堂检测，完善内化课堂知识。 通过世界首例试管婴儿和我国首例试管婴儿图片为切入点，重点讲解体外受精技术，以图文结合形式讲解卵母细胞的采集和培养，精子的收集和获能方法；接着讲解受精过程；结合图示，设计问题，对此进行比较分析，并总结规律，由此突破这一难点内容。 1978年7月25日世界首例试管婴儿 1988年3月10日我国首例试管婴儿 1.资料上用到了什么生物技术？ 2.试管婴儿和母亲正常怀孕的过程有何异同？ 体外受精 胚胎移植 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 概 念：试管动物技术 待解决的问题： 国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元；牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生只能生育四五次。牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右；公牛产生的精子数目就更多了。 一、从试管牛说起 试管动物技术过程： 第一步：体外受精 第二步：早期胚胎的培养 第三步：胚胎移植 请同学们分小组设计并绘制“试管牛”工厂化生产的技术流程图解。 胚胎移植 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 1982年世界首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。 体外受精 早期胚胎 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 中受精。 二、体外受精 卵母细胞 精子 试管 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 1.卵母细胞的采集和培养 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集： 最常用的方法是卵巢经过 处理，具体做法是给供体注射 ，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 超数排卵 促性腺激素 输卵管 大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。 卵巢 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 B超活采仪 超声波引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。 操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱 2.精子的收集和获能 收集精子的方法有： 假阴道法 手握法 电刺激法 在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。 对于啮齿动物、家兔和猪的精子，一般采用_________________；对于牛、羊等家畜的精子常用_____________________________。 培养法：精子在____________________中获能。 化学诱导法： 精子一定浓度的_____________或___________________________________________________________中，用化学药物诱导获能。 培养法 化学诱导法 培养法 化学诱导法 获能液 肝素 钙离子载体A23187溶液 精子的获