ELISA试剂的选用和质检课件.pptVIP

ELISA试剂的选用和质检 上海心语生物科技有限公司 影响试剂盒质量的因素 试剂盒的选用 试剂盒的质检方法 目前试剂盒存在的问题 影响试剂盒质量的因素 1．原材料 (1)固相材料 商品ELISA试剂盒中基本上都使用聚苯烯塑料微孔板，其对ELISA试剂盒的影响在于孔间的显色差异。 (2)抗原 --自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。 纯 度：纯度不高可致试剂盒的特异性不强。 立体结构：合成抗原一般都是多肽抗原，缺乏完整抗原所具有的立体结构决定簇，用于相应的抗HCV和抗HIV抗体的检测有可能导致结合上述决定簇的抗体漏检。 影响试剂盒质量的因素 (3)抗体 多克隆抗体(多抗)：制备简单，含针对抗原的多种决定簇，但抗体的亲和力和特异性相对要低于单抗，且每次制备的抗体在其亲和力和特异性上均有区别。 单克隆抗体(单抗)：可无限大量的得到针对单一决定簇的抗体，缺点是结合的单一性。当建立双抗夹心ELISA测定方法时，如包被和指示抗体使用同一单抗，则由于结合位点的缺乏，很容易造成假阴性结果，尤其是在使用一步法时“钩状”效应(Hookeffect)的出现。因此，在使用单抗建立双抗夹心ELISA方法时，包被和指示抗体常使用针对抗原的不同决定簇的单抗，包被抗体可为混合单抗，从而使得固相抗体在免疫测定中能更为完全地结合待测物中的特异抗原。 影响试剂盒质量的因素 (4)酶结合物 ELI