新型微载体培养系统中BHK-21细胞的生长特性研究.pdf

动物医学进展。2013，34(3)：32—36 ProgressinVeterinaryMedicine 新型微载体培养系统中BHK一21细胞的生长特性研究 王进产 ，焦金波 ，何 翠，张海洋 ，乔荣岑，白朝勇，剥、进忠 (普莱柯生物工程股份有限公司，河南洛阳471000) 摘 要：使用BellCell一500AP生物反应器和 BioNOC@一II微载体 ，对BHK-21细胞在此新型高密度培养 生物反应器中的生长特性进行研究。将含有 1．5×10 个BHK一21细胞的细胞悬液加入含有微载体的生物 反应器内，待细胞贴附后加入细胞生长液，每 日取载体计算细胞总数 ，观察 BHK一21细胞 的生长特性 ，并分 析葡萄糖消耗规律。经过 6d培养载体中细胞总数达到峰值 ，细胞密度是起始接入数量的31倍 (4．41×10。 个)，并且葡萄糖 日消耗量与细胞增殖速度具有一定的相关性。试验成功实现 了BHK-21细胞 的高密度培 养，为以BHK一21细胞为生产基质的病毒疫苗生产提供 了一条简便快捷的途径。 关键词 ：生物反应器；微载体 ；BHK一21细胞 中图分类号 ：Q813．11 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(2013)03—0032—05 目前我国兽医生物制品生产过程 中，细胞培养 型，分发酵式培养和微载体式培养。动物细胞 以贴 设备相对 比较落后 ，大多是在转瓶内旋转贴壁培养， 壁细胞为主，因此微载体培养式生物反应器在病毒 这样不仅劳动强度大，操作复杂 ，容易造成污染 ，并 疫苗制备应用更为广泛。微载体培养式生物反应器 且转瓶还常出现贴壁不均匀 ，易造成不同批次细胞 又分搅拌式和固定床式生物反应器 ，BellCell是美国 的差异l1]。为了提高产量 ，只有通过增加培养转瓶 Cesco公司研发的一种能有效地进行细胞内外营养 数 ，而这往往受到生产场地的限制，生物反应器就弥 和气体交换的新型 固定床式生物反应器 ，BellCell一 补了这些不足口]。生物反应器根据动物细胞贴壁类 500AP生物反应器一个 500mL培养瓶可 以提 收稿 日期 ：2012—10—08 基金项 目：河南省重大公益性科研项 目(81100912300) 作者简介：王进产(1979一)，男，河南人，硕士，主要从事动物细胞培养与人兽共患病研究。*通讯作者 豢帐豢 岽豢岽靠 [12] ChenPJ，WeiCC，WangC，eta1．Promoteranalysisofin— [14] TanakaT ，TanakaK ，OgawaS，eta1．Anacutemyeloidleuke— terleukin19EJ]．BiochemBiophysResCommun，2006，344 miagene，AML1，regulateshemopoieticmyeloidcelldifferenti— (3)：713-720． ationandtranscriptionalactivationantagonistical1ybytwoal— [13] HarendraGG，JayasekaraRW，DissanayakeVH．Haplo— ternativesplicedforms[J]．EMBOJ，1995，14(2)：341—350． typesofheparin—-bindingepidermal—-growth—-factor-likegrowth [15] 许发美 ，邢海燕 ，田 征，等．AMLla在小鼠造血细胞增殖 factorgeneareassociatedwithpre-eclampsia[J]．JObstet 分化异常中的作用[J]．中国实验血液学杂志，2011，19(6)： GynaecolRes，2012，38(1)：239—246． 1477—148l_ CloningandPromoterPredictionofcOR52A17Gen