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4、固相免疫检测 典型的例子是酶联免疫吸附试验(ELISA),ELISA有多种检测形式。最简单的检测形式是间接ELISA。其基本原理是将抗原固定在ELISA板中,如果血清中含有对应的抗体,则这些抗体的头部能够与固定的抗原结合,然后通过洗涤,洗去被检血清中没有结合的生物分子,再加入某种酶标记物,这种酶标记物能够结合被检血清中抗体分子的尾部,然后在洗涤,把没有结合的酶标记物洗去,最后再加入显色剂来显示ELISA板中是否发生了抗体分子和抗原分子特异反应,如果发生了特异反应,则有颜色反应,说明血清中有特异性抗体的存在。 胶体金免疫检测也是一种固相免疫反应。例如,检测禽流感抗原的胶体金试纸将特异性的抗体固定在试纸的特定位置上,如果待测的样品中含有禽流感病毒的蛋白,也就是抗原,则这些抗原将结合在这些固定的位置上,结合后又导致试纸上能够游动携带有胶体金颗粒的抗体结合在这个特定的位置(这些携带有胶体金颗粒的抗体也与禽流感病毒抗原发生结合),从而显示出颜色。 5、中和试验 中和试验往往是针对病毒病的。某动物如果自然感染某种病毒,或人工接种相应的疫苗,那么一段时间后,此动物的血清一般含有针对此病毒的特异性抗体。用其血清和此病毒按照一定比例相互混合后,则可以使得病毒失去感染细胞或动物的能力;相反,阴性血清和该病毒相互作用,该病毒仍然具有感染细胞或动物的能力。中和试验往往是血清抗体检测的“金标准”方法之一,但有些以细胞免疫为主的疫病,感染的动物不一定产生具有中和病原毒力作用的抗体。此外,中和试验往往生物危险性比较大,而且耗时比较长,对技术的要求也比较高。 6、补体结合试验 补体结合试验的原理是抗体和特异性的抗原结合后,抗体尾部隐藏的补体结合位点暴露出来,从而能够结合补体。补体结合到抗体上,能够发生相应的肉眼可见的生化反应。补体结合试验往往也是血清抗体检测的“金标准”方法之一,但是对技术要求也比较高。 谢 谢! 3、病原已经不存在,但是相应的疫病存在。病原感染宿主后,病原被清除了,但是还可能存在疫病。一方面病原引起的损伤恢复可能比病原清除的时间长,另外有些疫病属于迟发型免疫病理反应所致的疫病。 4、存在抗体,说明相应的疫病存在。这种情况适合于持续性感染的并且没有对宿主动物接种相应的疫苗的一些疫病,如动物布鲁氏菌病。 5、存在抗体,但是相应的疫病并不存在。很多动物感染发病康复之后,病原和症状都已经消失,但是抗体长期存在。这适用于流感、甲型流感、日本脑炎等疫病。有些刚出生的动物存在母源抗体,免疫接种后的动物产生相应的抗体,这些抗体的存在都不能表明疫病存在。 6、不存在抗体,但是疫病存在。这原因有几种①新近感染,抗体还没产生;②有些宿主免疫功能很弱,还没有产生抗体;③有些疫病,不诱导抗体产生。 第二节 传染源、传播途径和易感动物 传染源、传播途径和易感动物是动物疫病传播三大要素。 一、传染源 传染源指体内有病原的生长、繁殖并且能排出病原的动物,一般有以下几类: 1、感染并正在发病的动物; 2、感染将要出现症状的动物,也就是说处于潜伏期内的动物; 3、康复后携带病原的动物,如猪感染猪瘟病毒而发病,康复后,猪可能会长期携带猪瘟病毒; 4、隐性感染的动物,感染某种病原,但是没有出现临床症状的动物。 一个被感染的动物能够向外界排出活的病原的一段时期被称为传染期。传染期因病原、宿主种类和个体的不同而有所差异。 二、传播途径 传播途径是病原从传染源到达和侵入易感动物的过程。通常有以下6种途径。 1、经空气传播 2、经食物传播 3、经体液传播 4、经媒介节支动物传播 5、经伤口传播 6、垂直传播 三、易感动物 动物个体对某种病原的易感性决定于动物品种、体质、年龄、性别、行为、免疫情况等因素。 动物群体易感性是一群动物,如某个养鸡场所有的鸡,对某种疫病的易感程度。它取决于以下2个方面: 1、该群中易感个体所占比例; 2、群体免疫力,该群对于动物疫病的侵入和传播的抵抗力,取决于该群中有免疫力个体所占比例,如某鸡场所有鸡都接种了H5N1禽流感疫苗,则该群鸡针对此病的群体免疫力有望很高。群体的免疫力是一个动态的参数,可以因为时间延长、出栏、补栏、死亡、其他疫情而发生变化。 第三节 影响动物疫病传播和流行的因素 一、自然因素 最明显的是气候因素和地理因素,他们影响动物疫病传播和流行的原因有以下几点: 1、改变病原在体外的存活时间; 2、改变宿主的抵抗力; 3、改变媒介生物的群体规模; 4、改变感染动物和易感动物的行为; 5、改变感染动物或自然储存宿主的分布。 二、社会因素 第四节 动物疫病的防控基本原理 动物疫病防控基本原理是消灭传染源、阻断传播途径和
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