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CD34+细胞与急性加重期慢性阻塞性肺疾病的关系 　　摘要：目的 检测急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者（AECOPD）外周血中CD34+细胞的数量变化。方法 收集2015年1月～10月的急性加重期慢性阻塞性肺疾病住院病例50例，同时收集45例性别、年龄无差别的同期健康体检者作为对照组，采取密度梯度离心法，取得外周血单个核细胞，应用免疫磁珠分选方法，分离出CD34+细胞，一并计数，比较两组试验者外周血CD34+数量的变化。结果 AECOPD患者组外周血CD34+数量明显低于健康对照组，P0.05。结论 急性加重期慢性阻塞性肺疾病（AECOPD）患者外周血CD34+细胞数量较健康人减少，CD34+细胞数量可作为评价COPD严重程度的指标。 　　关键词：CD34+细胞；慢性阻塞性肺疾病（COPD）；急性加重期 　　急性加重期的慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD）会导致患者住院率以及死亡率近年来不断地增加，国外有学者通过对慢性阻塞性肺病急性加重期（AECOPD）患者的研究发现，中重度COPD患者外周血中CD34+细胞数量明显减少，并且外周循环血中CD34+细胞数量的减少能显著地加大心血管系统疾病的发病风险。 　　对于慢性阻塞性肺疾病（COPD）的患者，其外周血CD34+细胞数目的变化情况，在国内的研究报道相对比较少，本实验主要就观察急性加重期慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD） 患者外周血中CD34+细胞的数量是否有降低[1-5]。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 2015年1月～10月在包头医学院第二附属医院呼吸科住院的AECOPD患者，筛选50例，平均年龄（65±10）岁。同一时期收集医院体检科性别、年龄无差别的健康体检者45例，作为对照组，平均年龄（60±5）岁。慢性阻塞性肺疾病急性加重是指患者咳嗽、咳痰、喘息症状在近期内急剧加重，并且咳脓痰，痰量增多，可有发热等炎症反应症状。入选的健康体检者，肺功能、胸片、血常规检查均无异常，无吸烟史，既往没有呼吸系统疾病史，并且近1个月内没有患过疾病。 　　1.2方法 　　1.2.1采集标本 所有参与试验者晨起空腹抽静脉血15～20ml，分离CD34+细胞并计数。 　　1.2.2 CD34+细胞的分离及计数：①将静脉血稀释，用Ficoll梯度分离液分离出单个核细胞（MNC）；②将单核细胞悬浮于100μLPBS溶液中，并加入CD34+抗体混合物，在常温下孵育15 min；③按照50μL磁珠/mL细胞悬液的比例加入磁珠，室温下孵育10 min；④再用PBS缓冲液将细胞悬液的体积调整至2.5 mL，均匀混合后，磁极中插入试管，静置5 min后，将试管中的上清部分倒出；⑤细胞被标记磁性，在磁场中被磁场吸引，其仍然留在试管中，最后的2个步骤再重复3次后，即可得到CD34+细胞；⑥将其放光镜下计数CD34+细胞，计算其平均数。 　　1.3统计学分析 所有测定出的数据全部用SPSS17.0统计软件进行统计分析，其中呈正态分布的计量资料用（x±s）表示，两组间正态分布样本的比较，使用两样本t检验，显著性水平值α取0.05，P0.05则差异有统计学意义。 　　2 结果 　　AECOPD患者组外周血CD34+细胞数量明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P0.05）。见表1。 　　3 讨论 　　慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以气流持续受限，呈进行性发展，气流受限不完全可逆为特征的疾病，其发病率以及病死率近年来不断增高，因而越来越受到人们的重视，而CD34+细胞与慢性阻塞性肺疾病的关系，以及在慢性阻塞性肺疾病急性加重期中数量的变化，近年来也越来越引起很多国内外学者的重视。CD34+细胞存在于骨髓内，在细胞因子等作用的调节下，迁移至外周血中，并粘附在血管，增殖并分化成为内皮细胞。内皮祖细胞主要由表达CD34+的细胞组成，其特征标记是CD34+、CD133+，而目前对于内皮祖细胞的定性，还没有统一的标准。 　　通过本实验研究发现，急性加重期慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD）患者外周血CD34+细胞的数量明显地低于健康对照组，而AECOPD患者外周血中CD34+细胞数目的减少，关于其减少具体的机制目前仍不是十分清楚，国外有学者研究推测，AECOPD患者外周血中CD34+细胞数目的减少可能与其自身的炎症反应有关，从而导致CD34+细胞数目的降低。 　　在本实验研究中，我们可以大致分析得出：AECOPD患者外周血CD34+细胞数量较正常健康对照组是明显减少的，可作为评价COPD严重程度的指标之一，为后续进一步研究CD34+细胞与慢性阻塞性肺疾病的关系提供理论依据。 　　参考文献： 　　[1]刘杨丽，刘笑然，谢灿茂.慢性阻塞性肺疾病合并心血管疾病的机制及分子标志物的变化[J].国