发酵工程第九章发酵过程控制讲解.ppt

（1）影响尾气中CO2浓度的因素 通入空气量： 呼吸强度： CO2溶解度： 菌体量： （2）CER变化规律 CO2积累量渐增，与x曲线对应，基本类似S型曲线变化； 当工艺和设备参数一定的情况下，CER与x有比例关系（CER∝菌体生长速率）； CO2浓度变化与O2浓度变化成反向同步关系。 ∫[CER]dt，菌体干重的时间曲线 1-[CER]dt；2-菌量 （1）研究参数CO2的意义 作为代谢产物或中间前体，尾气中CO2积累与生物量成正比，通过C质量平衡估算生长速率和细胞量。 高浓度CO2对发酵多表现为抑制作用，应实施测量与 控制； 尾气CO2不仅直接反映代谢情况，而且和其它参数及补料操作密切相关，可作为工艺优化的指标。 （2）CO2对细胞的作用机制 “麻醉”作用 CO2及HCO3-都会影响细胞膜的结构，使膜的流动性及表面电荷密度发生变化，导致许多基质的跨膜运输受阻，影响了细胞膜的运输效率，使细胞处于“麻醉”状态，细胞生长受到抑制，形态发生改变。 （3）CO2对菌体生长及产物形成的影响 CO2↑, 基质分解速率↓，ATP ↓ ，中间产物↓或形态变异导致产量↓ 高浓度CO2抑制作用的独立性: 只要CO2在培养液中浓度过量，即使供氧充足（CLCCr），CO2的抑制作用不能解除，这种负作用在放大过程更明显。 正确评价通气的作用： 供氧： 排废气：CO2 水分及挥发性组分的散失 （4）CO2释放与补糖速率的关系 在青霉素发酵中补糖将引起排气CO2增加，同时pH下降。 糖、CO2、pH三者的相关性，被青霉素工业生产上用于补料控制的参数，并认为排气CO2的变化比pH变化更为敏感，所以测定排气CO2释放率（CER）来控制补糖速率。 补糖与溶氧及pH协同控制 补糖速率与CER控制 补糖对排气CO2和pH的影响 （5）呼吸商与发酵的关系 不同菌株、同一菌株不同代谢途径、同一菌株利用不同基质、同一菌株在不同发酵阶段，RQ值不相同。 RQ值可以表征发酵状况。 青霉素发酵不同阶段： 菌体生长阶段：RQ＝0.909 维持阶段：RQ=1 生产阶段：RQ=4 如果产物的还原性比基质大时，其RQ值就增加； 反之，当产物的氧化性比基质大时，RQ值就要减少； 其偏离程度决定于单位菌体利用基质形成产物的量。 产物形成对RQ影响最大 一、基质浓度对发酵的影响 二、补料控制 SKS情况下，比生长速率与基质浓度呈直线关系： 一般情况下符合Monod方程式 基质浓度高时 低浓度限制 高浓度抑制 谷氨酸发酵（乙醇为碳源）：当乙醇浓度为2.5g/L和35g/L时，可延长谷氨酸生产时间，但在更高浓度下，菌体生长受到抑制，谷氨酸产量降低。 分解阻遏作用 e.g.葡萄糖氧化酶发酵：葡萄糖用量从8%降至6%，补入2%氨基乙酸或甘油，使酶活力分别提高26%或6.7%。 （1）补料的目的 （2）补料的内容 （3）补料的原则 （4）补料控制的策略 （5）反馈控制参数的确定 （6）补料速率的确定 （7）补料时间的优化 二、补料控制 （1）补料的目的 避免基质浓度过低的限制 解除基质过浓的抑制 解除产物的反馈抑制 解除分解代谢物阻遏作用 避免因一次性投糖过多造成细胞大量生长，耗氧过多而造成波谷现象。 在生产上，补料还经常作为纠正异常发酵的一个重要手段。 （2）补料的内容 补充微生物所需的碳源 补充菌体所需要的氮源 补充微量元素或无机盐 添加前体、诱导剂等 （3）补料的原则 补料的原则就在于控制微生物的中间代谢，使之向着有利于产物积累的方向发展。 补料速率、时间很重要。 现有的各种补料措施都是通过实验方法确定的。 中间补料的数量为基础料的1～3倍 。 大多数补料分批发酵均补加生长限制性基质 以经验数据或预测数据控制流加； 用传感器直接测定限制性基质的浓度，直接控制流加； 以物料平衡方程，通过传感器在线测定的一些参数计算限制性基质的浓度，间接控制流加； 以溶氧、pH、RQ、排气中CO2分压及代谢物质浓度等多参数间接控制流加。 （4）补料控制的策略 （5）反馈控制参数的确定 为了有效地进行中间补料，必须选择恰当的反馈控制参数，以及了解这些参数与微生物代谢、菌体生长、基质利用以及产物形成之间的关系。 e.g. 谷氨酸发酵 在谷氨酸发酵过程中的某阶段，生产菌的摄氧率和基质消耗速率之间存在着线性关系。 K=1.51 K=1.75 K=2.16 谷氨酸发酵中K值对糖浓度的控制的影响 （6）补料速率的确定 优化补料速率是补料控制中十分重要的一环，补料速率要根据微生物对营养等的消耗速率及所设定的培养液中最低维持浓度而定。 补