微生物学及检验技术111讲解.doc

第一章 卫生检验综合知识 “中华人民共和国计量法”是1985.9.6由中华人民共和国第二十八号主席令公布的，自1986.7.1起施行。 计量法中有关的条文有：第五条：国务院计量行政部门负责建立各种计量基准器具，作为统一全国量值的最高依据。 第八条：企业、事业单位根据需要，可以建立本单位使用的计量标准器具，其各项最高计量标准器具经有关人民政府计量行政部门主持考核合格后使用。 第二十二条：为社会提供公证数据的产品质量检验机构，必须经省级以上人民政府计量行政部门对其计量检定、测试的能力和可靠性考核合格。 计量法实施细则：1987年国家计量局发布的“中华人民共和国计量法实施细则”其中 第三十二条：为社会提供公证数据的产品质量检验机构，必须经省级以上人民政府计量行政部门计量认证。 计量认证：本规范经国家技术监督局于1990年7月20日批准，并自1990年11月1日起施行。 卫生部于1981年发布的《卫生标准管理办法》第一条规定：卫生标准是国家的一项重要的技术法规，是进行预防性和经常性卫生监督的重要依据。 卫生标准可分为：强制性标准和推荐性标准；又分为国家标准、行业标准、地方标准和企业标准。 国家标准以“GB”表示，国家推荐性标准以“GB/T”表示；卫生部发布的卫生行业标准以“WS”表示，推荐性标准表示为“WS /T”。 卫生标准制定状况：建国后最早颁发的卫生标准是在1953年；正式列入国家标准编号的第一个卫生标准是1956年颁发的“工业企业设计暂行” 卫生标准；到1996年底，我国已有卫生国家标准1200项，到2004年止，与劳动卫生标准配套的标准方法已有249多个；与环境卫生标准配套的居民区大气标准方法已有20多个；与食品卫生标准配套的标准方法，其中理化检验方法已有70多个，微生物学检验方法已有30多项。 我国的卫生标准由“全国卫生标准技术委员会”及其专业委员会负责制定和评审，又国家质量技术监督局和卫生部审批。 中华人民共和国传染病防治法：1989年2月21日第七届全国人民代表大会常务委员会第六次会议通过。 2004年8月28日第十届全国人民代表大会常务委员会第十一次会议修订。 中华人民共和国传染病防治法：共79条 本法自2004年12月1日起施行。 传染性非典性肺炎：（简称为非典性肺炎，AP）是指2002年11月起，我国局部地区发生的、主要以近距离空气非沫和密切接触传播为主的呼吸道传染病，临床主要表现为肺炎，在家庭和医院有显著的聚集现象。 世界卫生组织于2003年4月16日，在13个WHO网络会议上宣布一种新的冠状病毒是DNASARS的病毒，从而为SARS防止提供了依据。 医学分子生物学 （一）、病毒的概念： 病毒是一类体积微小、结构简单、具有严格的寄生于活细胞的微小生物，它们具有下列几种基本特征： 1、病毒的基本结构是由核酸（基因组）与蛋白质组成，由DNA或RNA组成核心，外有一蛋白外壳（核壳），有些病毒在核壳外面另有一层脂蛋白组成的包膜包围着。 2、病毒只在活细胞中增殖，因为病毒缺乏完整细胞器等必要装置，所以必须依赖宿主细胞提供高分子合成装置和能量。 3、病毒非常微小，无细胞结构，绝大多数不能用光学显微镜检查，而必须用电子显微镜才能察见。 第一节核酸基本知识：一、核酸化学：DNA是脱氧核糖核酸的英文缩写。RNA与DNA差别在核糖2，位带有一个羟基。 DNA ①DNA起储存遗传信息作用，并以核苷酸排列顺序形式储存遗传信息。②由4种核苷酸组成DNA分子，由碱基互补维持DNA双螺旋结构。③在动植物、细菌、真菌中都含有DNA，但在病毒中（非细胞型微生物）不一定含DNA。④DNA为长丝状分子互相纠缠（jiuchan）））））用煮沸法从表达内切酶A的大肠菌小量制备质粒时不能省略酚-氯仿抽提。用煮沸法制备质粒所用溶菌酶液是用TrisCL配制的。 用乙醇沉淀溶于SDS中RNA时，要避免用乙酸钾。小量制备DNA时不被限制酶切开，应用酚-氯仿抽提。 用异丙醇沉淀核酸与用乙醇相比，最明显优点是可减少溶液体积。 1、质粒DNA提取：在用碱裂解法少量提取质粒DNA时，在缓冲液（Ⅰ液）中不含SDS。多数质粒在自然状态下是环状链DNA。 质粒DNA纯化方法有：离子交换分析；聚乙二醇分级沉淀；二凝胶过滤层析；氯化铯（se））））结合补体； 起到条理作用；结合SPA（葡萄球菌A蛋白）；起到沉淀反应；中和反应；溶解细菌。 H抗原主要刺激机体产生IgG类抗体；肥达试验IgG类H抗体出现较晚；IgG是人血清中的主要抗体 IgG是固定补体 IgM、①分子量最大；②早期多为IgM（IgM早期诊断）；③IgM是种属发育过程