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四章微生物的生长繁殖及其控制
无机盐的生理功能 (C)氧化还原电势(redox poyential) 各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求: 好氧微生物:+0.3~+0.4V,(在0.1V以上的环境中均能生长).厌氧微生物:只能在+0.1V以下生长 兼性厌氧微生物:+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵 培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统,测出的Eh值仅代表其综合结果。 对微生物影响最大的是:分子氧和分子氢的浓度 培养基中常用的还原剂:巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。 氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响 增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入 氧化剂,从而增加Ф值; 在培养基中加入抗坏血酸(0.1%)、硫化氢(0.025%)、半胱氨酸 (0.05%)、谷胱甘肽、二硫苏糖醇、庖肉等还原性物质可降低Ф值。 培养基中加入氧化还原指示剂刃天青可对氧化还原电位进行间接测定 氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响 3.1.4 根据培养基的应用目的选择原料及其来源 该培养基的应用目的,即: 是培养菌体还是积累代谢产物? 是实验室种子培养还是大规模发酵? 代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物? ☆用于培养菌体种子的培养基营养应丰富,氮源含量宜高(碳氮比低); ☆用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低,(但若发酵产物是含氮化合物时,有时还应提高培养基的氮源含量);若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物; ☆当所设计的是大规模发酵用的培养基时,应重视培养基中各成份的来源和价格,应选择来源广泛、价格低廉 的原料,提倡以粗代精,以废代好。 3.2.1.生态模拟 调查所培养菌的生态条件,查看“嗜好”,对“症”下料———初级天然培养基. 3.2.2.查阅文献 查阅、分析文献,调查前人的工作资料,借鉴人家的经验,以便从中得到启发设计有自己特色的培养基配方. 3.2.2.精心设计 借助优选法或正交试验设计法等方法. 3.2、设计培养基的方法 3.2.4、实验比 较: 不同培养基配方的选择比较 单种成分来源和数量的比较 几种成分浓度比例调配的比较 小型试验放大到大型生产条件的比较 pH和温度试验 ◆附1:配置培养基时应注意的几个问题及解决方法: 1、沉淀 2、胶体强度的破坏 3、褐色物质的形成 4、pH发生变化 高压蒸气灭菌 一般培养基: 1.05 Kg/cm2, 121.3℃, 15-30 min 含糖培养基: 0.56 Kg/cm2, 112.6 ℃, 15-30 min 过滤灭菌, 分别灭菌, 间歇灭菌的应用 附2:培养基的灭菌 附图:过滤灭菌 附3:器皿的灭菌及无菌室的消毒 器皿的灭菌: 干热空气: 160℃, 2 小时 无菌室的消毒: 紫外光 化学药物熏蒸(苯酚;高锰酸钾+甲醛) * 第四章 微生物的生长繁殖及其控制 1.1 微生物的营养要素 1.1.1 微生物细胞的化学组成 微生物细胞 水:70%-90% 干物质 有机物 蛋白质、糖、脂、核酸、维生素等 及其降解产物 无机物(盐) 微生物、动物、植物之间存在“营养上的统一性” 细胞化学元素组成: 主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等; 微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。 1、微生物营养 1.1.2元素在细胞内存在形式: 上述元素主要以水、有机物、无机盐的形式存在于细胞中: ◆有机物:蛋白质、糖、脂类、核酸、 维生素及其降解产物. ◆无机物:1)参与有机物组成, 2)单独存在于细胞质内以无机盐的形式存在. ◆水:约占细胞总重70%~90%,以游离水和结合水两种形式存在 游离水:干重法可测得; 结合水:不易蒸发、不冻结、也不能渗透,
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