产气荚膜梭菌精要.pptx

产气荚膜梭菌C.perfringens ● 产气荚膜梭菌旧名魏氏梭菌(C. welchii)或产气荚膜杆菌(Bacillus per fringens)，在自然界分布极广，可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中。在一定条件下，可引起多种严重疾病。 ●产气荚膜梭菌是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌，因能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量气体，导致组织严重气肿，继而影响血液供应，造成组织大面积坏死，加之本菌在体内能形成荚膜，故名产气夹膜梭菌。 1、生物学特征 形态：G+ 两端平齐的粗大杆菌，单个或成双排列，偶见链状；无鞭毛。 大小：大小（1~1.5）μm×（3~5）μm。 芽孢：卵圆形位于菌体中央或近端，直径大于菌体的直径，有的菌株难形成芽胞。 荚膜：在人和动物活体组织内，或在含血清的培养基内生长时可形成荚膜。 2.培养特性 ●不严格的厌氧 ●普通营养琼脂上可生长，若加入葡萄糖、血液则生长更好。 ●适宜生长温度为37—47℃。 ●生长和繁殖速度极快，在适宜条件下8min/代。 ●在45℃高温下可进行快速分离纯培养，每培养3—4h传种1次， 较易分离纯化。 普通琼脂平板：培养15小时左右可见到菌落，培养24小时菌落直径2~4mm，圆形、凸起、光滑、半 透明、边缘整齐、无迁徙生长现象。 肝片肉汤培养：大量产气，培养5h-6h变浑浊。 庖肉培养基： 产生大量气体，肉渣或肉块，略带粉红，但不消化。 牛奶培养基： 分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状， 并将液面上的凡士林层向上推挤，甚至冲开管口棉塞，气势凶猛，称为“汹涌发酵”。 血琼脂平板：菌落周围出现双层溶血环。内层溶血完全，是由于θ毒素的作用；外环不完全溶血则 是由α毒素所致，好似靶状，菌落本身略带灰黄色至浅灰褐色，与空气接触30min后， 有时可能逐渐变为灰绿色、甚至鲜绿色。 乳糖牛奶卵黄琼脂平板：菌落周围出现乳光浑浊带，此反应能被本菌的α抗毒素抑制。 *由于发酵乳糖，菌落周围的培养基颜色发生变化。 *本菌不消化牛奶，不分解游离脂肪，菌落周围不出现透明环及虹彩层（肉毒梭菌可形成）。 3.生化特性 ●发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖及蔗糖，产酸产气。 ●液化明胶。 ●还原硝酸盐为亚硝酸盐。 ●能将亚硫酸盐还原为硫化物，在含亚硫酸盐及铁盐的琼脂中形成黑色菌落。 本菌在含糖的厌氧肉肝汤中，因产酸于几周内即可死亡，而在无糖厌氧肉肝汤中能生存几个月。 芽胞在90℃30min或100℃5min死亡，而食物中毒型菌株的芽胞可耐煮沸1～3h。 4.抵抗力 5、抗原性与致病性 依据主要致死性毒素与抗毒素的中和试验可将此菌分为A、B、C、D、E五个 型， A、C、D、能产生肠毒素。 A型主要引起人的气性坏疽和食物中毒的病原，也引起动物的肠毒血症； B型主要引起羔羊痢疾； C型主要的绵阳猝狙病原，也引起羔羊仔猪的肠毒血症和坏死性肠炎； D型主要引起羔羊、牛、灰鼠的肠毒血症。 实验动物以小鼠最易感染，以液体培养物0.1-1.0mol/L肌注或皮下注射，常在12-24小时引起死亡。 6.微生物诊断 ●主要依靠细菌分离鉴定，各型所致的疾病，均因为细菌在肠道内产生毒素所致，细菌本身不一定侵入机体，同时正常畜禽肠道内也存在此菌，在非本菌致死的动物也容易在死后本菌的感染，因此从病料中检出此菌也不能说明他就是病原。所以当分离到毒力强大的此菌时才具有一定的参考意义。 ●鉴定本菌要点：厌氧生长，有双层溶血环，引起牛奶的爆裂发酵，肌注小鼠过夜死亡并在胸肌涂片见有荚膜的菌体。 ●有效微生物诊断方法是肠内容物毒素的检查，取出内容物，适量灭火生理盐水稀释，离心沉淀取上清液分两份，一份不加热，一份加热，分别静注小鼠，如有毒素存在，不加热组常在10分钟至10小时内死亡，加热组不死亡。 7、免疫防治 ●加强饲养管理，防治由于饲养原因使肠道正常菌群大量滋生产生毒素。 ●预防羔羊痢疾，猝狙，肠毒血症以及仔猪肠毒血症可用三联疫苗或者五联疫苗。 THANKS!