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动物实验的基本操作方法讲述
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动物实验的基本操作方法
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报告主要内容
实验动物的识别
抓取
标记方法
给药途径和方法
实验动物的麻醉
实验标本的采集
实验动物的处死
肿瘤大小测量
肿瘤细胞皮下接种
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如何判断小鼠性别
成年鼠性别很易区分,雄鼠的阴囊明显;雌鼠可见阴道开口和五对乳头。生殖器与肛门的距离也可判定,近者为雌性,中间无毛;远者为雄性,中间有毛。仔鼠或幼鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定。
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♀
♂
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如何抓取小鼠
先用右手抓住鼠尾并提起,放在实验台上,在其向前爬行时,顺势用左手的拇指和食指抓住其两耳和头颈部皮肤,然后把鼠体翻转向上置于左手心中,把后肢拉直,用左手的无名指及小指夹住鼠尾部即可。对于操作熟练者,可采用左手一手抓住法,右手可不必放下注射器等工具。操作时应小心被小鼠抓咬。不同的操作也对应着不同的抓取方式,需在技能练习中慢慢体会。
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如何标记小鼠
耳钉标记法:用左手食指及拇指抓紧鼠左耳及左半边脸和颈部,背部朝上,用酒精棉擦拭一下右耳,右手持装好耳钉的耳钉夹,将耳钉开口夹住尽量平展的右耳,最好夹住耳朵中部到根部的位置防止太边上容易脱落,用力握紧耳钉夹,使耳钉尖端扣入凹槽。注意动作要轻要稳以防用力过猛扯坏小鼠的耳朵;耳钉有数字的一面尽量朝外方便读数。建议两个人共同完成。
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如何标记小鼠
无耳钉标记法:
1、剪耳法
在小鼠双耳的不同部位上剪一三角口来表示不同号码。一般习惯是:左上为1,左下为2,右上为3,右下为4,左耳两刀为5,左右耳各一刀为6,右耳两刀为7,不剪为8
2、画尾巴法
一横为1,两横为2,三横为3,四横为4,一竖为5,一竖一横为6,一竖两横为7,一竖三横为8,一竖四横为9,不画为10。
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9#
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实验动物的给药途径和方法
灌胃(po)
这是一种用处较多的给药方法。有些药物采用其他注射方法效果不好,而用此法反而效果好;有些药物(如临床上的口服药用于动物实验)不能采取静脉注射、肌肉注射等方法而必须采用此法。
1、经口给药
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实验动物的给药途径和方法
用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤,将鼠抓持在手掌内,使其腹部向上,头部向上有一定的倾斜度,右手持注射器,从小鼠口角插入口腔,压其头部,使口腔和食管成一直线,再紧沿上腭和咽后壁慢慢插入食管,使其前端到达膈肌位置,然后把药液灌入胃内。灌时若很通畅,表示针头已进入胃内;若不通畅,动物有呕吐动作或强烈挣扎,表示针头未插入胃内,要立即拔出并按上述方法重操作。
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这种抓法不要抓得太紧,以免颈部皮肤向后拉,勒住食管,灌胃针不易插直或容易损伤食管;也不能抓得不紧,否则鼠在受压迫时容易挣脱掉而咬伤操作者的手指。也可用左手食指及拇指抓紧鼠右耳的方法来避免上述缺点
灌胃抓法
要点
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灌胃要点
动物要固定好;进针方向正确,
要沿着口角进针,再顺着食管方向插入胃内,
绝不能进针不顺而强行向里插,否则会捅破食管,
甚至注入肺内而造成动物死亡。
常用灌胃量为0.1-0.2ml/10g。
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实验动物的给药途径和方法
静脉注射(iv)
小鼠一般采用尾静脉注射
1、固定: 用小鼠固定器将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。
2、注射给药
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实验动物的给药途径和方法
2、血管的选择:小鼠尾部有三条静脉,左右两边的静脉比较浅,容易穿刺;中间一条位置较深,建议不选择。穿刺先远后尽,不要一开始就从尾根部,这样的好处是万一一次扎不进,还可以继续使用此血管。选择尾下1/4-1/3处比较好(约距尾尖2-3cm,因为尾梢端皮薄静脉浅,易于刺入;但不可离尾尖太近,防止尾巴碎断或不好固定)。
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实验动物的给药途径和方法
熟练的话看哪里血管清晰就扎哪里。 一般用75%酒精反复擦拭穿刺血管,使其充盈,并且使皮肤角质层软化,利于穿刺。或者在注射之前用约50度温水泡大约2分钟,使血管充分舒张,用干棉球擦干。或者直接用手握住尾巴,用手心的温度使其血管充盈。
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实验动物的给药途径和方法
3、针的选择:4号1ml注射器
4、注射手法:注射时左手扯尾,用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定。右手持注射器,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,进针时针尖朝下,使针头与尾部近似平行刺入尾静脉(针头与尾部夹角小于10°)在尾静脉内平行推进少许。针扎入时有落空感,针头沿血管进入,肉眼可关察到血液充盈针尖的那一瞬间,这是
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