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基因工程的基本工具 提取目的基因 及切割环状质粒 别 名:基因拼接技术或DNA重组技术 * 基因工程及其应用 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 转鱼抗寒基因的番茄 转基因鲑鱼 同时具有高产、稳产和抗逆性等优良品质的农作物新品种. 抗虫害的玉米 甲生物 乙生物 取出优秀基因 新类型 表达 新的生物产品 基因工程 剪刀 ——限制酶 针线——DNA连接酶 运输工具——运载体 目的基因与运载体DNA拼接 目的基因进入受体细胞 DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 请你尝试用EcoRI限制酶和DNA连接酶操作重组DNA分子的过程. 原 理: 操作水平: 结 果: 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 基因工程 的基本步骤 基因工程 的工具 限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶 运载体 目的基因与运载体结合 目的基因的表达和检测 将目的基因导入受体细胞 提取目的基因 ⒈要使目的基因与对应的载体重组, 所需的两种酶是( ) ①限制酶 ②连接酶 ③解旋酶 ④还原酶 A.①② B.③④ C.①④ D.②③ 2.基因工程的正确操作步骤是( ) ①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特 定性状要求 ④提取目的基因 A. ③②④① B. ②④①③ C. ④①②③ D. ③④①② 3、在基因工程中,切割运载体和含有目 的基因的DNA片段,需使用( ) A、两种连接酶 B、两种限制酶 C、同种连接酶 D、同种限制酶 4、实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA分子的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是利用了酶的( ) A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性易受外界影响 5、以下是两种不同的限制酶切割形成的 DNA片段: (1)——CTGCA ——G (2)——G ——CTTAA (4) G—— ACGTC—— (3)AATTC—— G—— 你能用DNA连接酶将它们连接起来吗? 和 能连接; 和 能连接。 1 4 2 3 我们也是基因工程的产物哦!再见! 标记基因,便于进行检测 1、基因的运输工具——运载体 常用的运载体: 质粒、噬菌体 和动植物病毒 环状DNA 容易从细胞中取出或放入 能与宿主细胞友好相处 自主复制 2.基因的“剪刀”:限制性核酸内切酶(限制酶) 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。 专一性 如:EcoRI限制酶 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 3、基因的针线──DNA连接酶 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 *
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