勃林格的猪繁殖与呼吸综合症问题2007.10探析.doc

猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)控制 问题解答 一、PRRS病原 1．蓝耳病的病原是什么？ 蓝耳病，又称猪繁殖与呼吸综合症（PRRS），其病原是猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）。该病毒是有囊膜的RNA病毒，属套式病毒目动脉炎病毒科。 2．蓝耳病病毒的组成成分有哪些？ PRRSV粒子呈球形，有囊膜，表面有纤突。病毒核衣壳呈二十面体对称，内含单股正链RNA。PRRSV的基因组约15KB，有8个开放阅读框（LRF），编码的蛋白包括复制酶、聚合蛋白和结构蛋白。ORF1编码复制酶和聚合蛋白, ORF1α编码的聚合蛋白经裂解后产生6个非结构蛋白（Nsp 1α,Nsp1β和Nsp2-5）,其中Nsp2是最易发生变异的蛋白。迄今发现7种PRRSV结构蛋白，分别是核衣壳蛋白（N蛋白，ORF7编码）、非糖基化膜蛋白（M蛋白，ORF6编码）、GP2a、GP3、GP4、GP5四种糖基化囊膜蛋白（分别由ORF2—5编码）以及最新发现的GP2b蛋白。GP5、N蛋白是PRRSV主要的结构蛋白，其中N蛋白具有很多抗原表位，是刺激机体最早产生抗体的蛋白，但这些抗体不具中和作用，在诊断和血清学调查上的价值很大；GP5是产生主要中和抗体的抗原，但其抗原表位不是病毒的免疫优势表位，此外，发现GP3和GP4还含有中和表位。 PRRSV的变异性很强，其中，GP5、Nsp2是PRRSV最易发生变异的蛋白，GP5的变异表现在氨基酸序列的变化、糖基化位点的缺失和修饰、氨基酸缺失等方面。我国已发现Nsp2变异的高致病性毒株，主要表现为两个位点共30个氨基酸的缺失，482位氨基酸上的保守亮氨酸缺失，534到562位连续缺失29位氨基酸。 3．PPRSV在环境中能存活多长时间。 PPRSV是一种有囊膜的病毒，在环境中不稳定，对干燥尤其敏感。对热和酸、碱敏感，在环境中不会长时间存在。在-700C至-200C可存活数月至数年；血清40C存72h有85%的样品可分离到病毒。对热敏感，在200C到210C条件下，1—6天内病毒具有感染力；在370C，感染力仅能保持3—24小时；560C，仅保持6—20分钟。酸碱也影响病毒活力，PH值低于6或高于7.5，病毒感染力迅速丧失。这种敏感性造成以下现象：在PRRS流行期间，并不能持续地从流产胎儿和死胎中分离出病毒。用于病毒分离的血清和组织样品应保存在-200C或40C条件下，以保护样品中PRRSV病毒的感染性。 4．怎样分离PRRSV？ PRRSV可在原代猪肺巨噬细胞（PAM），传代细胞系CL2621和Marc145中生长增殖。在每种细胞中，病毒呈杀细胞复制，引起细胞变圆、成堆和核固缩，感染细胞最终从培养瓶上脱落。各种毒株对PAM均有很强的适应性，因为PAM是病毒最重要的靶细胞，病毒最初的分离就是用PAM获得的。所以用PAM能比较容易的分离野毒株。 5．PRRSV对哪些消毒剂敏感？ 普通消毒剂、洗涤济易将PRRSV灭活。氯仿和乙醚等脂溶剂可灭活PRRSV。在低浓度的去污剂溶液中，PRRSV很不稳定，病毒囊膜被破坏，释放出无感染性的核心粒子并丧失感染性。在室温条件下，氯仿（0.03%）可在10分钟内完全灭活PRRSV，碘（0.0075%）或季铵化合物（0.0063%）只需用1分钟。有研究表明交通工具的清洁、清洗、消毒和干燥都有助于灭活PRRSV。 二、PRRS发病机制 6．PRRSV是如何感染猪只的？ 蓝耳病病毒经吸入、摄食、交配、咬伤或针头传播进入机体后，在粘膜、肺、局部巨噬细胞中复制。此外，病毒还可经污染的精液进入子宫而感染母猪。感染发生12小时以内，病毒到达局部淋巴结，而后形成病毒血症。随后扩散到全身的单核细胞和组织巨噬细胞中，进而引起临床症状。 7．PRRSV是如何持续感染猪只的？ 病毒可在猪肺泡巨噬细胞或淋巴细胞内复制增殖几个月，但被感染动物不表现明显的临床症状。这也是PRRSV感染最为重要的流行病学特征。有试验显示母猪感染PRRSV 99天后仍能将该病传播给易感猪。妊娠90天子宫内感染，在分娩后132天仍能从仔猪的扁桃体和淋巴细胞结内分离到病毒。持续感染与感染时的猪龄无关。无论是胎儿、青年猪还是成年猪均会发生持续感染，病毒不被免疫系统识别而持续存在，但其逃避免疫的方式可能不是不断的病毒变异。有研究者发现PRRSV持续感染猪体内的病毒变异较少。 8．目前我国流行的PRRSV毒株变异程度如何？不同毒株同时存在会否发生重组？ 作为RNA病毒，PRRSV的基因在合成时容易出现内在性错误，可出现点突变、删除、添加和毒株间基因重组，因此PRRSV的基因容易发生变异。但迄今为止在中国仅发现美洲株PRRSV，但各地分离到的不同毒株的基因组存在广泛变异，其毒力各不相同。但根据毒株的致病力不同，可将其分为弱毒力、中等毒力的强毒力毒株。弱毒力毒株不导致或