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[ 应用纪要] 使用基于2D技术的ACQUITY UPLC分析干血斑和血浆中的瑞舒伐他汀 Claude Mallet 1 、Jennifer Simeone2 和 Paul Rainville3 1沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)分离科技工作流程整合团队 2沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)分离营销实验室 3沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)制药事业部 应用优势 简介 ■ 无需蒸发和复溶步骤 在生物分析领域，动物和人体试验的主要内容是分析生物液体(尿 液、血浆和血液)中目标分析物及其代谢产物。因此，使用了各种 ■ 稳定的样品制备过程 提取和分析技术来进行定性和定量分析。为了实现准确定量，必 ■ 出色的重现性 须从基质中分离出目标分析物1,2，所得到纯净且浓缩的提取物可以 通过GC-MS或LC-MS进行痕量检测(ng/mL)分析。 在方法开发过程中，如果分析方案要求进行亚级(ppb)检测，通常都 会包含一个富集步骤。因此，提取过程中需要大量样品。对于人 体和大型动物试验而言，可提供足够的样品量(体积或质量)用于 痕量水平分析。然而，对于临床前试验，来自小型啮齿动物(大鼠、 小鼠、豚鼠等)的样品体积则少得多，可能会对采样频率有所限制。 因此，“微量采样” 的概念作为可能的替代方法受到关注。从物流 角度讲，液体样品为装卸和运输增加了另一层困难。因此，“干血斑” (DBS)概念允许直接将微量– (200 μL)样品采集到吸附剂支持卡上。 经过充分的风干后，可以在室温下对干燥的样品进行存储和运输。 当DBS卡运送至实验室，接下来的挑战就是从干燥的基质中分离出 目标分析物。 DBS卡的提取过程需要使用穿孔切割技术从支持结构(通常是纤维 素)上去除结合的物质。穿孔切割技术利用圆盘刀具切割DBS卡的 固定表面。然后，使用水或有机溶剂(异丙醇、甲醇、乙腈等)对 圆盘进行固-液萃取。水性萃取中，如果提取物的质量良好，则取 一小份(10 μL)进行LC-MS/MS分析。然而，多数情况下，有机溶剂萃 取的回收率更高。 沃特世解决方案 基于2D-LC技术的ACQUITY UPLC? 关键词 干血斑、血浆、2D色谱、柱头稀释 1 [ 应用纪要] 实验 因此，在提取方案中必须增加溶剂转换步骤。该步骤通过使用蒸 发和复溶步骤去除有机溶剂来完成。最常用的方法是利用氮气流 色谱和MS/MS条件 进行蒸发，但并非易事：众所周知，这可能会引起蒸发损失并且 上样条件 可能造成回收率较低。 色谱柱：