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类风湿关节炎动物模型研究进展 　　【摘 要】 类风湿关节炎动物模型复制是研究类风湿关节炎发病机制及药物治疗效果的关键环节。构建一种经济简便、与人类风湿关节炎病理特点相符合的动物模型尤为重要。近年来，建立的类风湿关节炎动物模型，主要包括胶原诱导性关节炎模型、佐剂性关节炎模型、胶原抗体诱导关节炎模型、降植烷诱导关节炎模型、联合免疫缺陷小鼠模型和卵清蛋白诱导的兔类风湿关节炎模型，但均存在各自的优缺点。通过对近几年常用的几种类风湿关节炎动物模型进行综述，以期为今后研究更接近人类风湿关节炎病理特征的动物实验模型提供参考。 　　【关键词】 关节炎，类风湿；动物模型；发病机制；综述 　　类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以侵蚀性关节炎为主要表现的全身性自身免疫 　　病[1]。本病以女性多发，男女患病比例约1∶3。RA控制不佳可致残，因此研究本病的发病机制，探索控制或延缓病情进展的治疗方法，对提高患者生活质量具有经济和社会效益。然而如何复制出更接近RA的动物病理模型一直成为困扰风湿免疫专业学者的难题，寻找与RA发病机制更为接近的动物模型对研究疾病潜在病理、药物发现和疗效验证具有重要意义[2-3]。近年来，针对RA动物模型的研究方兴未艾，除了经典的胶原诱导性关节炎（CIA）模型及佐剂性关节炎（AA）模型以外，又有了胶原抗体诱导关节炎（CAIA）模型、降植烷诱导关节炎（PIA）模型、联合免疫缺陷小鼠（SCID）模型和卵清蛋白诱导的兔RA（OVA）模型。本文就上述模型最新进展做一综述。 　　1 常用模型 　　1.1 CIA模型 　　1.1.1 CIA模型概述 CIA模型是1977年由Trentham团队构建的免疫性炎症关节炎模型，以多发性的四肢末端关节炎为主要临床表现[4]。CIA发病是由T细胞诱导的免疫反应激活、炎性因子释放、Ⅱ型胶原抗体产生等环节共同决定的[5]。 　　1.1.2 CIA模型造模方法[6] 用双蒸水将冰醋酸稀释成0.01 mol?L-1，0.2 μm微孔膜过滤除菌，4 ℃保存过夜。用2.5 mL冰醋酸稀释10 mg牛 　　Ⅱ型胶原，制成终质量分数为4 mg?mL-1的溶液。锡箔纸保存避光，4 ℃环境下完全溶解过夜（该溶液可在-20 ℃环境下储存6周）。使用时根据动物数量与完全弗氏佐剂按1∶1比例混合，在0 d时鼠尾根部皮内注射，每只DBA/1小鼠给予0.1 mL 　　乳剂，21 d后加强免疫（与不完全弗氏佐剂等比混合），建立CIA模型。C57BL/6小鼠需使用鸡Ⅱ型胶原。 　　1.1.3 CIA模型特点 在造模30 d后出现炎症高峰，表现为实验动物双侧足爪明显肿胀，可累及前爪，造模时间与疾病进行性加重呈正相关。优势是免疫学过程和关节表现与人类具有较高的一致性[7-8]。 　　1.2 AA模型 　　1.2.1 AA模型概述 AA又称弗氏佐剂关节炎模型，是一种使用广泛的风湿性关节炎动物模型，可用于预测许多药物对RA的临床疗效。致病原理主要是基于抗原模拟机制，位于结核杆菌上的某个蛋白分子在结构上与关节滑膜上的某个糖蛋白分子相似，由此形成的抗体诱发了针对关节的免疫反应。 　　1.2.2 AA模型造模方法[9] 将热灭活的结核分枝杆菌混悬于0.1 mL弗氏完全佐剂，以0.1 mL剂量皮下注射6周龄Lewis大鼠。表现为致炎18 h 　　后出现足肿胀，通常于造模后2～3周内达炎症高峰，随后有自愈倾向，继发病变一般出现于 　　10 d左右，20 d左右达高峰。虽然所有的大鼠发病过程相似，但它们的炎症表现不尽相同，这为探索初期炎症的严重程度和关节功能之间的联系提供了机会。 　　1.2.3 AA模型特点 早期炎症反应的部位常出现在造模对侧和前爪，呈进行性加重，活动不便，耳和尾部出现类风湿结节，实验动物体质量下降，特别是继发性自身免疫性肿胀，这些表现与人RA表现相近，提示AA大鼠与RA患者在关节肿胀方面具有相似性[10]。AA具有发病迅速的特点，病程具有自限性，缺乏慢性改变过程，造模43 d后病理改变基本恢复正常[11]。 　　1.3 CAIA模型 　　1.3.1 CAIA模型概述 早在1998年，人们就在运用胶原抗体来诱导RA的CAIA模型。此模型适用于BALB/C小鼠、DBA/1小鼠，而C57BL/6小鼠模型反应性低。此模型是研究RA发病机制和治疗药物筛选的理想模型。 　　1.3.2 CAIA模型造模方法[12] 8周龄雄性DBA/1小鼠，在0 d时腹膜腔注射鼠单克隆Ⅱ型胶原抗体（An Arthrogen-CIA? 5-clone cocktail kit），每只1.5 mg?（0.15 mL）-1，3 d后，腹膜腔注射大 　　肠杆菌脂多糖，每只50 μg?（0