临床检验剖析仪器.ppt

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临床检验剖析仪器

临床检验分析仪器 临床化学分析仪 电解质分析仪 血气分析仪 血液学测定装置 比色和分光光度仪 朗伯-比尔定律及其应用 单色光经过有色溶液时,透过溶液的光强度不仅与溶液的浓度有关,而且还与溶液的厚度及溶液本身对光的吸收性能有关: A = KCb A为消光值:A= lg(I0/I); K为溶液的消光(吸收)系数; C为溶液的浓度; b为光程,即溶液的厚度(有时也以L表示)。 摩尔消光系数 一种有色溶液对于一定波长(单色光)的入射光的K值具有一定数值。若溶液的浓度以mol/l表示,溶液厚度以cm表示,则此时的K值称为摩尔消光系数,它是有色化合物的重要特征之一。 光电比色计的基本原理 若先配制一已知浓度的标准溶液,根据朗伯-比尔定律,有:As=Ks·Cs·bs。 待测浓度的溶液:Ax=Kx·Cx·bx。 如使bx=bs,Kx=Ks,即光程和溶液已知,则有 As/Ax=Cs/Cx 或 : Cx=(Ax/As)Cs 光电比色计结构 光源与聚光镜 光源强度保持不变是获得准确测定结果的重要因素(稳压器)。光电比色计通常用6~12V的钨丝灯泡作发光光源(320~1100nm)。聚光镜使从光源射来的光成为平行光。 滤光片 滤光片的作用是只让一定波长范围的光透过,而将其余不需要的波长光滤去。常用的滤光片有吸收滤光片、截止滤光片、复合滤光片等。 比色皿 比色皿是用来盛装所分析的样品液的。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;而在紫外区,需要用能透紫外线的材料,如石英玻璃来制作。由于经常用来盛装各种化学溶液,比色皿除了应具有良好的透光特性之外,还应有较强的耐腐蚀性。 光电检测器 在检验仪器中常使用的光电检测器有光电池、光电管、光电倍增管等,是利用光电效应把光能转化为电能的器件,它必须满足以下三个条件: 光电转换必须满足恒定的函数关系。 波长响应范围宽。 灵敏度高,响应速度快,产生的电信号易于检测和放大,噪音低。 分光光度法 利用单色分光器产生波长可连续变化的电磁波照射溶液。因溶液中的分子吸收能量而在宏观上表现为透射光强度变小。若将照射前后光强度的变化转变为电信号并记录下来,就可以得到一张光强度变化对波长关系曲线图——分子吸收光谱图。 由于分子吸收光谱与物质本身的结构有关,吸光度的大小与物质的含量有关,利用吸收光谱的形状和吸收程度的大小即可对物质进行定性和定量的分析。这种方法就叫做分光光度法。 分光光度计 紫外-可见光分光光度计 光焰光度计 原子吸收分光光度计 荧光分光光度计等 分光光度计仪器结构: 从光源发出的光,经单色器色散后,变为单色光。单色光经过比色皿中的被测溶液后照射到光电管上。光电管将这一随溶液浓度不同而变化的光信号转换成电信号,再经放大器,由微安表将透光度T或吸光度A显示出来。 调节单色器可以使不同波长的单色光穿过比色皿,从而测量比色皿中的样品对不同波长的光的吸光度。 分光光度计调零和调满刻度 在实际使用中,分光光度计需要进行调零(T=0)和调满刻度(T =100%)。 调零时,关上光门使之没有光线射入探测器,调节电位器2,提供一个合适的电压以抵消光电管本身产生的暗电流或其它原因造成的零漂,使输出信号为零(T=0)。 调满刻度时,将参比溶液置于光路中,通过调节电位器1来调节光源灯两端的电压,改变光源灯的亮度使输出信号为满刻度。 常用的分光光度计的光学系统有:单光束光学系统、双光束光学系统和双波长/双光束系统等。由于对不同波长都需要作调零,采用单光束光学系统需要把参比溶液皿和样品皿来回的换位,不利于光谱的扫描。使用双光束光学系统可以便于光谱的扫描, 721分光光度计外形及内部结构 火焰光度计 每一元素都有其特定发射光谱,其谱波长为特异性的。 以火焰为激发源,对某些金属元素的发射光谱进行光度分析的方法称为火焰光度法。 样品经喷口成雾状,与燃料混合进入火焰,待测碱金属原子离解生成基态原子,并被火焰激发,辐射出自身的特征谱线。用单色器或滤光片选择出所测元素的特征谱线,送入光电检测器,经放大并显示结果。 雾化器与混合室、火焰共同组成火焰原子化器,是样品原子化的场所。 原子吸收分光光度计 原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectrometry,AAS)是以测量气态基态原子外层电子共振线的吸收作为基础的分析方法,可对60多种元素作微量(ng/ml)定量测定(符合朗伯-比耳定律)。原子从基态到激发态吸收特定波长的光使入射光变弱、变暗,通常为线状光谱。 溶液是分子吸收光谱。 荧光 物质经高能量射线(如紫外线)激发后,所发出的比原激发光波较长的可见光叫荧光。任何能发出荧光的分子都具有两种特征光谱,激发光谱和发射光谱。 荧光分光光度计 激

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