肿瘤生物学国家重点实验室.docVIP

肿瘤生物学国家重点实验室 实验室于2006 年被评为肿瘤生物学国家重点实验室。实验室总面积3300平方米，设备总值 700 万元。实验室设组织细胞培养和病毒载体包装单元、蛋白质功能学、Q-PCR单元、流式细胞仪和基因操作分子克隆单元功能单元。主要研究方向为（1）消化道道肿瘤的发病机制和转移机制（2）胃癌肝癌诊断的早期预警研究；（3）慢性肝病的干细胞治疗和胆汁性肝淤积发病机制研究。实验室专职研究人员3名，其中正高2名、中级1名。在国家211工程经费资助下近年来实验室新进购置了大量先进仪器，拥有美国BD公司流式细胞仪1台、Roache 公司和MJ公司荧光定量PCR仪各1台、Bio-rad凝胶电泳分析仪、SORVA高速低温离心机、forma细胞培养箱台，荧光显微镜--正置、倒置--各1台及照相系统一套（OLYMPUS）具体位置：西京消化病医院15楼 ? 单元简介： 目前的医学科学研究，无论是分子生物学水平还是细胞生物学水平，也无论是转基因小鼠还是基因敲除小鼠的制备，实质上都是针对单个基因或蛋白质的“分子解剖性”研究。而要操纵一个基因或蛋白质的表达，离不开对其编码基因或cDNA的克隆与操作。基因克隆与体外操作功能单元为国家认可的基因扩增检测专业实验室，拥有从DNA/RNA制备与目的基因检测一套完整的技术方法，配备了MJ PCR和Roache荧光定量PCR仪、Bio-rad凝胶电泳分析仪、SORVA高速低温离心机、PICO台式高速冷冻离心机、上海悦丰生化培养箱和东联细菌培养摇床等，能独立进行引物设计、真核细胞和原核细胞DNA/RNA提取、反转录、常规PCR、梯度PCR、实时荧光定量PCR等系列试验，主要进行基因的体外扩增、克隆以及定点突变、截短、缺失和融合等改造，并进行各种DNA的大量扩增与制备，最终为后续的基因转染提供条件。同时本实验室具有丰富的基因克隆与体外操作实验经验，能更好的为实验的开展提供技术上的支持。本单元我们可以提供用PCR或RT-PCR扩增目的基因的cDNA片段、目的基因与载体的重组、目的基因的定点突变、目的基因截短体、结构域缺失等突变体的制备、融合表达载体的制备、质粒DNA的大量扩增与制备等技术支持和实验服务。本实验室备有常规的检测试剂，具体请咨询西京消化病医院实验室。 ? 开放实验项目： ? 1.用PCR或RT-PCR扩增目的基因的cDNA片段 项目说明：PCR技术全称聚合酶链式反应,利用模板变性、引物退火和引物延长的多个循环来将一段目的DNA序列扩增到十万到百万倍，以便通过肉眼观察到结果，是检测核酸的一种高特异性、高灵敏度和高精确度的技术。RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应，是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术，使检测灵敏性提高了几个数量级，更易于分析极为微量RNA样品。PCR技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。本实验室拥有多台进口PCR仪，建立了RNA提取与目的基因检测的一套较完整的技术方法，配备了凝胶电泳分析仪等设备，能进行引物设计、真核细胞RNA提取及反转录PCR（RT-PCR）、琼脂糖电泳等实验。可提供引物的设计合成、普通PCR方法的建立及分析等服务。 收费标准：不含试剂：100元/样本（院内）；140元/样本（院外）。 联系方式：乔泰东 电话 ? 2.目的基因与载体的重组 项目说明：目的基因与载体重组是将外源DNA与载体分子连接，重新组合DNA，包括粘端连接法和平端连接法。重组DNA技术一般包括四步：获得目的基因；与克隆载体连接，形成新的重组DNA分子；用重组DNA分子转化受体细胞，并能在受体细胞中复制和遗传；对转化子筛选和鉴定。应用重组DNA技术可以克隆和扩增某些原核生物和真核生物的基因，从而可以进一步研究它们的结构和功能。另外还可以用于动植物育种和基因治疗。本实验室可以提供目的基因与载体重组的完整实验设计及实验室技术支持和结果的分析。 收费标准：不含试剂：500元/样本（院内）；700元/样本（院外）。 联系方式：乔泰东 电话 ? 3.目的基因的定点突变 通过PCR等方法有效地向目的基因中引入任何所需的DNA变异，包括碱基的添加、删除、点突变等，在实验室中改造、优化基因，以迅速、高效地改变DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，从而研究蛋白质结构和功能之间复杂关系。定点突变技术可以用于研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性，改造启动子或者DNA作用元件，提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构，以及药物研发、基因治疗等等方面。本实验室可以提供目的基因定点突变的完整实验设计方案及实验室技术支持和结果的分析。 收费标准：不含试剂： 500元