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CRISPRCas9基因组编辑技术及其在动物基因组定点修饰中的应用
Hereditas (Beijing) 2015 年 10 月, 37(10): 1011―1020
综 述
CRISPR/Cas9 基因组编辑技术及其在动物基因组定点
修饰中的应用
1 1 2 1 1
周金伟 ，徐绮嫔 ，姚婧 ，余树民 ，曹随忠
1. 四川农业大学动物医学院，成都 6 11130；
2. 中国科学院动物研究所，计划生育生殖生物学国家重点实验室，北京 100101
摘要:CRISPR/Cas 系统是细菌和古生菌中抵抗外源病毒或质粒入侵的获得性免疫系统，利用 CRISPR RNAs
(crRNAs) 引导Cas 核酸酶沉默入侵的核酸。通过分子生物学改造使Ⅱ 型CRISPR/Cas 系统成为一种高效的基因
组定点修饰技术，并且比锌指核酸酶(Zinc-finger nucleases, ZFNs)和 TALE 核酸酶(Transcription activator like
effector nucleases, TALENs)结构更简单，更容易设计和应用。文章主要介绍了CRISPR/Cas9 系统成为高效基因
组定点修饰技术的发展历程、Ⅱ 型CRISPR/Cas 的工作原理和改造过程以及在动物基因组定点修饰的应用，剖
析了该技术存在的问题和现有改进方案，并与成功案例相结合展望了 CRISPR/Cas9 系统的应用前景，以期为
动物性状改良和人类疾病动物模型的创立提供新思路。
CRISPR/Cas9；基因组编辑技术；人类疾病动物模型；基因组定点修饰
关键词:
CRISPR/Cas9 genome editing technique and its application in
site-directed genome modification of animals
1 1 2 1 1
Jinwei Zhou , Qipin Xu , Jing Yao , Shumin Yu , Suizhong Cao
1. College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China;
2. State Key Laboratory of Reproductive Biology, Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
Abstract: CRISPR/Cas system, which uses CRISPR RNAs (crRNAs) to guide Cas nuclease to silence invading
nucleic acids, is self-defense system against exogenous virus or plasmid in bacteria and archaea. Through molecular
modification, the type ⅡCRISPR/Cas system has become a highly efficient site-directed genome editing technique,
which is simpler than zinc-finger nucleases (ZFNs) and transcription activator like effector nucleases (TALENs) and
easier to be designed and applied. In this review, we summarize the evolutionary history of CRISPR/Cas9 system, the
working principle and
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