生物化学 八篇 遗传信息的贮存和表达
第八篇 遗传信息的贮存和表达
(第三十二~四十三章 小结)
第三十二章 DNA复制
DNA复制是以DNA为模板合成相同DNA分子的过程,其主要特征有:需要模板、四种dNTP和Mg2+;被复制的区域必须进行解链;半保留复制;需要引物,作为引物的主要是短的RNA,少数是蛋白质;复制的方向始终是5′→3′;具有固定的起点;多为双向复制;半不连续性;高度有序、高度进行和高度忠实。
参与DNA复制的主要酶和蛋白质有DNA聚合酶、解链酶、SSB、引发酶、拓扑异构酶、连接酶和端聚酶等。
DNA聚合酶是参与DNA复制的主要酶。大肠杆菌细胞中有DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ。大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅰ也称为Kornberg酶,是一种多功能酶,具有5′→3′的聚合酶活性、5′→3′和3′→5′的外切核酸酶活性。使用特殊的蛋白酶处理聚合酶Ⅰ得到的大片段称为Klenow酶,具有3′→5′外切酶和5′→3′聚合酶活性,Klenow酶的手指-拇指-掌心三维结构模式出现在许多具聚合酶上。聚合酶Ⅱ也具有3′→5′外切酶活性,但无5′→3′外切酶活性,参与DNA的修复。聚合酶Ⅲ由多个亚基组成,虽然也具有5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性,但却分属不同的亚基。该酶是参与大肠杆菌染色体DNA复制的主要酶。完整的聚合酶Ⅲ由核心酶、滑动钳和钳载复合物组成。在DNA复制过程中,滑动钳松散地夹住DNA模板,并能自由地向前
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