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* 本章作业 1、糖的概念。 2、如何判断单糖构型；如何判断α、β异头物？ 3、糖苷键的形成及分类。 糖类是多羟基的醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。 2、糖类的概念 葡萄糖 果糖 D-、L-是人为规定的单糖的构型。是以D-，L-甘油醛为参照物，以距醛基最远的不对称碳原子为准，羟基在左面的为L构型，羟基在右的为D构型。 天然存在的单糖是D-型的，天然氨基酸是L-型。 构型划分原则（以甘油醛分子为基准） α和β异头物 C1上的醛基成环后形成一个新的羟基，即半缩醛羟基，此时C1原子变成了不对称C原子，有两种不同构型的异构体，即α-型，β-型。规定如下：半缩醛羟基与决定构型的醇羟基处于同侧者，即为α-型；互为相反侧者即为β-型。 C1称为异头碳原子，α-和β-两种不同形式的异构体称为异头物（anomer）。 3）糖的成苷作用 糖苷：单糖分子中的半缩醛羟基易与醇或酚的羟基脱水缩合生成缩醛，在糖化学中称这种缩醛为糖苷。 苷元：糖苷分子中的非糖部分叫苷元。 O-糖苷键：糖+醇（或酚）O-C糖苷键； N-糖苷键：碱基+核糖（N-C糖苷键）； C-糖苷键：假尿苷C-C糖苷键。 寡糖和多糖都是单糖通过糖苷键连接而成。 问答题 1、简述蛋白质a-螺旋和B-折叠的结构特点。 2、按照R基团的化学结构将20种常见氨基酸分类并写出其结构式。 3、简述肌红蛋百和血红蛋白的结构特点，以此为例试述蛋白质空 间结构和功能的关系。 4、试述5种蛋白质分离纯化的方法及原理。 5、试述5种测定蛋白质含量的方法及原理。 ? 名词解释 等电点（pI）、 肽、 一级结构 二级结构 三级结构 四级结构 超二级结构 结构域 蛋白质变性与复性 第七节 蛋白质的分离、纯化（P300） 是蛋白质工程和基因工程重组蛋白纯化的主要内容之一，是蛋白质生物活性物质的生产、应用及研究领域不可缺失的重要环节。 蛋白质分离、纯化指：将蛋白质从混合物、生物体、培养基或包涵体中取出，再与杂质分开，获得与预定目的要求相适应有一定纯度的蛋白质产品过程。 一、蛋白质分离、纯化的一般步骤 二、蛋白质分离方法 三、蛋白质含量的测定与纯度的鉴定 蛋白质分离、纯化的一般步骤 1、选择一种目的蛋白含量丰富、稳定性好的样品材料。 2、将蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来 3、确定分离纯化的方法，使粗品的纯度达到预定要求。 4、建立灵敏、特异、精确的检测方法，分步测定蛋白质的含量，检测蛋白的纯度。 5、在操作、分析过程中注意保持蛋白质的稳定性，防止蛋白变性。 蛋白质分离方法 1、根据分子大小 （1）透析 （2）密度梯度离心 （3）凝胶过滤 2、利用溶解度差别 （1）蛋白质的盐溶和盐析法 （2）有机溶剂沉淀法 （3）等电沉淀法 （4）温度对蛋白质溶解度的影响 3、根据电荷不同的纯化方法 （1）电泳 （2）离子交换层析 4、利用选择性吸附的纯化方法 5、利用对配体的特异性生物学亲和力 透析：利用蛋白质分子不能透过半透膜，而一些小分子可以自由透过的性质，将蛋白质和小分子物质分离开来。 超滤：利用压力或离心力，借助于超滤膜将不同分子量的物质进行分离的技术。 密度梯度离心 蛋白质颗粒在具有密度梯度的溶液（蔗糖密度梯度）中离心时，可以根据其分子量和密度的大小不同离心，每种蛋白质颗粒沉降到与本身密度相等的溶液中即停止不前，最后各种蛋白质在离心管中被分离成各自独立的区带。 分成区带的蛋白质可以在管底开一小孔，将离心分层的蛋白质分部收集。 蛋白质的盐溶和盐析法 在稀盐溶液中，蛋白质的溶解度随盐浓度的增加而升高，这种现象称为盐溶（salting in).但是当盐溶液上升到一定浓度时，蛋白质的溶解度又会逐渐下降，直到某一浓度时便从溶液中析出的现象称为盐析(salting out)。混合浓度的蛋白质可用不同浓度的盐溶液使其分别沉淀，这种分级沉淀的方法称为分段盐析。 盐溶与盐析的原理 盐溶：当蛋白质分子吸附某种盐离子后，其带电表层使蛋白质分子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子之间的作用加强，因而溶解度增加。 盐析：当大量的中性盐加入到溶液中，使水的活度降低，导致蛋白质分子表面电荷被中和，水化膜逐渐被破坏。最终导致蛋白质分子间相互凝结沉淀。 注：盐析法沉淀蛋白质并未破坏天然构象，