离子通道病-生精选.ppt

神经系统离子通道病  Patch Clamp Recording Technique 2、离子泵（Ion pump） 通过消耗能量的方式进行逆电化学浓度差的离子转运，例如：钠钾泵、钙泵等，本质是ATP酶，为主动转运。 （1）钠钾泵 构成：由２个大亚基、２个小亚基组成的4聚体，也称Na+-K+ATP酶。 工作原理：对离子的转运循环依赖自磷酸化过程，所以叫做P-type离子泵。每个周期转出３个钠离子，转入２个钾离子。 钠钾泵的作用 ①维持低Na+高K+的细胞内环境 ②维持细胞的渗透性，保持细胞体积 ③维持细胞的静息电位 （2）钙离子泵 作用：维持细胞内较低的钙离子浓度（胞内钙浓度10-7M，胞外10-3M）。每分解一个ATP分子，泵出2个Ca2+。 位置：质膜、内质网膜。 Channel open and close Nicotinic acetylcholine receptor 概念： 　编码离子通道亚单位的基因发生突变?表达异常或体内出现针对通道的病理性内源性物质时，使通道的功能削弱或增强，从而导致机体整体生理功能紊乱。 Comparison of alpha 1A mutant diseases Cav1.1 mutants have decreased VACC current in Hypokalemic Periodic Paralysis- Unclear how this decreased activity causes HypoPP. 离子通道学发展趋势及存在问题 1、离子通道学研究最具影响的新技术 X-射线晶体衍射技术、高通量膜片钳技术、质谱、芯片技术、蛋白组技术、转基因技术、离子通道突变设计、电磁共振和核磁共振技术及荧光技术等。 构建完整的、生理状态的模型：反映一个细胞产生电信号的全过程和调节途径，包括调节基因转录、细胞内转运和细胞间信息通路，进一步构建整个组织模型。 2、怎样理解离子通道在细胞生理及病理状态下作用？ 重视微结构域中相邻分子间离子浓度改变及其效应 重视整体水平上的联系和相互作用：临床现象非常复杂，不可能用一个分离的离子通道直接解释，需要研究在体细胞生物活性和门控机制。通道功能、信号转导和细胞的网络行为及最终的总体表现之间的关系尚不清楚。 3、在门控通道研究中，最迫切解决的问题是什么？ 通道的门控机制、通道的调节机制、蛋白质之间的相互作用。（需要突变实验、分子动力学模拟和成像技术联合应用） 离子通道结构研究的后结构时代：X衍射晶体研究离子通道的静态结构，但并不能表示各种状态之间的相互转换，需要研究包括疾病状态或与疾病状态接近的改变。 4、天然毒素在离子通道结构－功能关系研究中的作用 特异、高亲和力的通道抑制剂和激动剂，在通道的功能及门控机制的研究中起着重要作用（特异阻断剂类似于基因敲除），也是新药设计的基础。 天然毒素的获得不易且随机，化学合成的方法将会有更多的机会。 5、人类基因组计划对离子通道研究的影响 人类基因组计划通过发现新的受体、新的通道亚基、相关分子伴侣和互作蛋白来影响通道的研究，有助于发现特殊受体或通道家族的亚基。 蛋白质组技术将会对研究通道蛋白的相互作用起到重要作用（蛋白质网络），有助于理解通道的结构及调节。 6、通道病治疗过程中，最关键问题是什么？ 重视靶通道的调节，而不仅仅关注通道本身。 通过干预通道调节来改变通道门控、活性、转运和失活，而不是仅限于直接结合通道蛋白的药物设计和研究，这样可避免通道功能的过度增强和完全抑制而产生不良后果。 7、动物模型在离子通道研究中的地位 人类和动物明显不同，人类电生理与鼠有明显差异（通道类型、通道密度大不相同） 大的动物模型与人类较为相似，任何动物模型获得的结果均需校正，最终应采取唯一的金标准－－人类模型 8、离子通道可以直接作为治疗靶点吗？ 对于广泛分布的通道蛋白，不适宜作治疗靶点，然而许多通道或通道伴随蛋白在组织和细胞上分布相当局限。 尽管通道的分布是广泛的，但选择性分布的药物同样可以达到选择性作用的目的。 9、未来研究中，哪些问题要突出解决？ 单个兴奋细胞离子通道与整体功能一致性 通道的选择性、门控机制、通道伴随蛋白的调节机制研究 结构/功能关系的阐明、连接通道蛋白的骨架蛋白的鉴定及其靶点的研究 通道的细胞生物学（包括通道的复杂装配及转运、通道引起的局部化学信息的改变） 实验室相关研究内容 温度对钾离子通道KCNQ2/KCNQ3结构和功能的影响 　研究发现KCNQ钾离子通道在热应激状态下的表达及功能变化，提示KCNQ在调节神经系统兴奋性方面发挥重要作用，且特异性KCNQ调节剂有望成为治疗神经疾病候选药物。 　　　揭示Kv1.3钾离子通道参与自身免疫疾病多发性硬化症