【全程复习方】（江苏专用）版高中生物 专题4 生物技术在其他方面的应用配套课件 新人教版选修1.pptVIP

* 专题4 生物技术在其他方面的应用 一、DNA的粗提取与鉴定 1.提取原理 DNA与杂质的_______不同，DNA与杂质对酶、高温、洗涤剂的__ _____不同。 溶解度 耐 受性 2.提取DNA的具体步骤 (1)实验材料的选取：本实验用____细胞做实验材料。 (2)破碎细胞，释放DNA：利用血细胞________的原理，注意玻 璃棒的__向搅拌，过滤取滤液。 (3)溶解细胞核内的DNA：在高浓度的NaCl溶液中，核蛋白容易 集聚，游离出的DNA溶解。 (4)DNA的析出：加蒸馏水降低NaCl溶液浓度，使DNA_____。 (5)DNA的初步纯化：将DNA丝状物再溶解、过滤，向滤液中加入 体积分数为95%的______溶液进行提纯。 3.DNA的鉴定 DNA在_______的条件下，与_______呈___色。 鸡血 吸水涨破 单 析出 冷酒精 沸水浴 二苯胺 蓝 二、血红蛋白的提取和分离实验 1.常用的分离方法：________法、凝胶电泳法等 2.基本原理 (1)凝胶色谱法的原理：相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗 粒的间隙，路程__，流动___；相对分子质量小的分子穿过多孔 凝胶颗粒内部，路程___，流动___。 (2)凝胶电泳法的原理：不同蛋白质的带电性质、_____、形状 和____不同，在电场中受到的作用力大小、_____、阻力不同， 导致不同蛋白质在电场中的运动____和运动_____不同。 凝胶色谱 短 快 长 慢 电量 大小 方向 速度 方向 3.血红蛋白的提取和分离程序 (1)样品处理： 红细胞的洗涤→________的释放→分离血红蛋白溶液 (2)粗分离——____：除去样品中相对分子质量较__的杂质。 (3)纯化：一般采用________法对血红蛋白进行分离和纯化。 (4)纯度鉴定：一般用________________________法来测定蛋白质 的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。 血红蛋白 透析 小 凝胶色谱 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 【点拨】 ①提纯出的DNA的鉴定还可用甲基绿染色的方法进行，甲基绿可将DNA染成绿色。 ②DNA聚合酶不能从头合成DNA子链，只能从引物的3′端开始延伸，从子链的5′端开始合成。引物的3′端与子链的5′端交汇于一点，属于对模板和产物的描述，两种说法都正确。 ③SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实质上测定的是组成蛋白质的多肽链的相对分子质量，电泳后形成的两条或多条带并不一定是杂质，如血红蛋白由两条α链和两条β链组成，本身就会形成两条带。 DNA 和蛋白质技术 1.DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同 DNA 蛋白质 2 mol/L NaCl溶液 溶解 部分发生 盐析沉淀 0.14 mol/L NaCl溶液 析出 溶解 溶解规律 NaCl溶液从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大 2.分离DNA和分离蛋白质的比较 实验原理 实验过程 实验结果 实验意义 分离DNA DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精 选取材料→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 获得较纯净的DNA 为DNA研究打下基础 分离蛋白质 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 样品处理→凝胶色谱操作 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 3.血红蛋白的提取和分离方法 (1)凝胶色谱法： ①含义：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法。 ②原理： a.相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。 b.相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。 (2)电泳法： ①含义：带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。 ②原理：利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异和分子本身大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 (3)缓冲溶液： ①组成：1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成。 ②作用：在一定范围内抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变，确保实验室条件下能准确模拟生物体内的代谢过程。 【高考警示钟】 比较琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (1)从载体上看，利用琼脂糖凝胶作为载体的是琼脂糖凝胶电泳，利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶作为载体的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (2)从依据上看，利用了分子带电性质差异和分子大小的是琼脂糖凝胶电泳，仅利用了分子大小的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (3)从优点上看，琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需处理，电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的