动物学整理讲义.doc

A 细胞融合：在自然条件下又能够人工方法是两个或两个以上的细胞合并形成单个细胞的过程。 体细胞杂交=细胞杂交：利用人工方法进行的细胞融合。异源细胞或原生质体相互接触进行膜融合、胞质融合和核融合形成的杂种细胞的过程。 融合阶段 两个阶段： 1异核体：融合细胞中来自两个亲本的细胞核尚未融合 2形成杂种细胞：两个细胞核的染色体集合为一个细胞核 四大融合技术： 介导细胞间发生凝集现象 1 灭活的仙台病毒介导：（生物法） 其表面含有与细胞膜表面起作用的糖蛋白和酶类，使细胞互相凝集且重新排布蛋白质分子和脂类分子，进入细胞内在细胞之间形成细胞质桥。 优点：病毒类融合剂中最有效、使用最广 2 PEG聚乙二醇介导（化学法） PEG作用：膜的脂类分子物理结构重排；膜的蛋白质分子重排；作用于膜磷脂极性基团和细胞膜表面，使磷脂表面电位下降和膜糖蛋白排阻体积减少最终产生缺口进行融合。 PEG分子量和浓度越大，融合率越高，细胞毒性和粘度也增大。 3 细胞电融合技术（物理法）：双向电泳接触紧密；短暂高压脉冲膜穿透融合；异核体；融合。 优点：在室温和生理条件下进行的小面积电场作用不影响细胞活力；直接观察获取异核体，不需要选择介质；大量细胞能快速相似地进行融合；适用广，用于酵母、植物，且杂交瘤产率高；最突出优点是对数量很少的细胞继续操作。 不利：仪器购置；融合大小不一的细胞时有问题；融合膜成分不同时有问题。