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高中生物 13 测定微生物的数量课件 中图版选修1
解析 A同学比其他同学的实验结果数据大,可能由于选取的土样不同,培养基灭菌不彻底或操作过程中有杂菌污染,也可能是操作失误,如配制培养基混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。 答案 A 下面对“从土壤中分离分解尿素的细菌过程中灭菌”的理解,不正确的是 ( )。 A.防止杂菌污染 B.消灭全部微生物 C.稀释土壤溶液的过程中必须在火焰旁操作 D.灭菌必须在接种前进行 答案 B 2. 探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。 实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。 材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱、酒精灯。 方法步骤: (1)倒平板 分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在________操作。 3. (2)制备土壤稀释液 取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至盛有9 mL的无菌水的大试管中,依次稀释到107稀释度。 (3)涂布 按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布________个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布________个。 (4)培养 放入恒温箱内,在28~30 ℃下培养3~4 d。 (5)细菌的计数 当菌落数目稳定时,选取菌落数在________的平板进行计数。 如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌数是________。 (稀释度是105) (6)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数________(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是 __________________________________________________。 答案 (1)酒精灯火焰旁 (3)3 1 (5)30~300 5×107 (6)多于 无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的自生固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存 课堂小结 课堂互动探究 热点考向示例 随堂达标检测 第三节 测定微生物的数量 血球计数板的构造 课程标准 1.测定某种微生物的数量。 2.用土壤浸出液进行细菌培养,仅以尿素为氮源,测定 能生长的细菌的数量。 课标解读 1.了解测定微生物数量的原理和方法。 2.观察菌落数,进行微生物数量的统计。 3.理解稀释平板计数法的原理和操作过程。 测定微生物数量的方法可分为两类:___________和_____ _______。 (1)常用方法 直接计数法中常用的是_________________ ,这种方法是先将待测样品制成_____,然后取一定量的悬液放在_______下进行计数。 测定微生物数量的方法 1.测定微生物数量的方法 2.直接计数法 直接计数法 间接 显微镜直接计数法 悬液 显微镜 计数法 (2)特点 该法所需_________,可迅速得到结果,而且在计数的同时能观察到所研究微生物的_________ 。其缺点是难以计数___________。这种方法一般适用于_______悬浮液中各种____________的计数。 间接计数法最常用的是_______________,它是根据微生物的_________而设计的计数方法。在样品中含菌数_____的情形下,也可以完成计数。 3.间接计数法 设备简单 形态特征 微小的细菌 纯培养 单细胞菌体 稀释平板计数法 培养特征 较少 (1)常用方法:显微镜直接计数法。 1.直接计数法 (2)过程:先将待测样品制成悬液,然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。显微镜直接计数示意图如右: (3)优点:所需设备简单,可迅速得到结果,而且在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征。 (4)缺点:难以计数微小的细菌。 (1)间接计数法最常用的是稀释平板计数法,它是根据微生物的培养特征而设计的计数方法。 2.间接计数法 (2)过程:将待测样品配制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开。再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内;或是将一定量的稀释液,与溶化后冷却至45 ℃左右的琼脂培养基混合,倾入无菌培养皿中,摇匀、静置待凝。经过培养后,就由单个微生物生长繁殖形成菌落,这样的一个菌落就代表着一个微生物个体。统计培养基中出现的菌落数,即可推算出检测样品中的活菌数。 (3)优点:在样品
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