南医大药物分析第15章甾体激素类药物的分析2015讲义.ppt

环上双键的表示方法： 用“?”表示 ,双键的位置写在?的右上角。?双键位置 ?? 活泼亚甲基反应（Zimmermann 反应） Kober反应缺点： （1）条件较难控制，易出双色→黄+红 （2）重现性较差： ① 呈色强度和稳定性受试剂浓度、组成、反应时间和温度的影响。 ② 甾体激素提取物中其他物质及制剂中稳定剂、赋形剂、溶剂对测定有干扰。 应用示例-1 氢化可的松 鉴别: （1）取本品约0.1mg，加乙醇1ml溶解后，加临用新制的硫酸苯肼试液8ml，在70℃加热15分钟，即显黄色。 （2）取本品约2mg，加硫酸2ml使溶解，放置5分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入10ml水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集283图）一致。 应用示例-1 氢化可的松 检查: 有关物质 照高效液相色谱法（附录VD）测定。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，量取与对照溶液中泼尼松龙峰相应的杂质峰面积，按外标法计算，其含量不得过0.5%，其他单个杂质的峰面积不得大于对照溶液中氢化可的松峰面积的1/2倍，未知各杂质峰面积的和不得大于对照溶液中氢化可的松峰面积的1.5倍。 应用示例-1 氢化可的松 含量测定: 照高效液相色谱法（附录VD）测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（28：72)为流动相；检测波长为245nm。取氢化可的松与泼尼松龙，加甲醇溶解并稀释制成每lml中约含5μg的溶液，取20μ1注人液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为泼尼松龙与氢化可的松，泼尼松龙峰与氢化可的松峰的分离度应符合要求。取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每l ml 中约含0. lmg的溶液，精密量取20μl注人液相色谱仪，记录色谱图；另取氢化可的松对照品，同法测定。按外标法以峰面积计箅，即得。?? 应用示例-2 醋酸地塞米松 鉴别: （1）取本品约10mg，加甲醇1ml，微温溶解后，加热的碱性酒石酸铜试液1ml，即生成红色沉淀。 （2）取本品50mg，加乙醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中加热5分钟，放冷，加硫酸溶液（1→2）2ml，缓缓煮沸1分钟，即发生乙酸乙酯的香气。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集546图）一致。 （4）本品显有机氟化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。 应用示例-3 醋酸泼尼松 鉴别: （1）取本品约1mg，加乙醇2ml使溶解，加10％氢氧化钠溶液2滴与氯化三苯四氮唑试液1ml，即显红色。（2）取本品约5mg，加硫酸1ml使溶解，放置5分钟，即显橙色；将此溶液倾入10ml水中，即变成黄色，渐渐变为蓝绿色。（3）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。（4）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集549图）一致。 应用示例-3 醋酸泼尼松 检查: 有关物质 取本品，加三氯甲烷-甲醇（9:1）制成每1ml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置50ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（9:1）稀释至刻度．摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录Ⅴ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（385:60:15:2）为展开剂，展开，晾干，在105℃干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 应用示例-4 甲睾酮 鉴别: （1）取本品数毫克，加硫酸-乙醇（2:1）1ml使溶解，即显黄色并带有黄绿色荧光。 （2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液的下峰保留时间一致。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集120图）一致。 应用示例-5 黄体酮 鉴别: （1）取本品约5mg，置小试管中，加甲醇0.2ml溶解后，加亚硝基铁氰化钠的细粉约3mg、碳酸钠及醋酸铵各约50mg，摇匀，放置10-30分钟，应显蓝紫色。 （2）取本品约0.5mg，置小试管中，加异烟肼约1mg与甲醇1ml溶解后，加稀盐酸1滴，即显黄色。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集434图）一致。 应用示例-6 炔雌醇 鉴别: （1）取本品2mg，加硫酸2ml溶解后，溶液显橙红色，在反射光线下出现黄绿色荧光；将此溶液倾入水4ml中，即生成玫瑰红色絮状沉淀。 （2）取本品10mg，加乙醇1ml溶解后，加硝酸银试液5-6滴，即生成白色沉淀。 （3）在含量测定项不记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （4）本品的红