福州大学至学蛋白质化学期末试卷.docVIP

福州大学 2006至2007学年蛋白质化学期末试卷 一、 名词解释(每小题 2分，共 20 分)? 1、二维电泳 2、盐析 3、必需氨基酸 4、沉降系数 5、包涵体 6、等电聚焦 7、蛋白质组 8、离子交换色谱 9、亚基 10、同源蛋白 二、填空(每空 1分，共 20 分)? 1、常常用N－溴代琥珀酰亚胺（N-bromosuccinimide）氧化反应测定氨基酸的含量，这一氨基酸是_______（用该氨基酸的3字母英文缩写回答） 2、在20中基本氨基酸中_______可用作食品的防腐剂（用该氨基酸的3字母英文缩写回答）3、阿斯巴甜是一种重要的二肽甜味剂，由两种氨基酸组成，它们是_______和_______ （用氨基酸的3字母英文缩写回答）4、蛋白质具有胶体性质，其溶液能够稳定存在的两个重要原因是_______和_______5、离子交换色谱分离蛋白质等生物大分子时，常用盐梯度洗脱的方式，洗脱杯有2个，分别为高盐溶液和低盐溶液，其中靠近出口处的洗脱杯为_______溶液6、用紫外光吸收法测定蛋白质含量的依据是所有的蛋白质分子中都含有_______、_______和_______三种氨基酸（用氨基酸的单字母英文缩写回答）7、单纯蛋白是 _____________________8、超高速离心是利用生物大分子_______的不同，经离心后分布于不同的液层而分离9、在生化分离中经常需要对蛋白质进行脱盐处理，常用的脱盐方法有_______和_______10、将分子量分别为a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_____________11、维系蛋白质一级结构的化学键是_______ ，维系蛋白质二级结构最主要的力是_______?12、谷氨酸的pK1(α-COOH)＝2.19, pK2 (α-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为__________13、当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_______离子形式存在；当pHpI时，氨基酸以________离子形式存在 ? ? 三、 简答题(每小题 6 分，共 36 分)? 1、某蛋白质样品在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上呈现一条分离带，用十二烷基磺酸钠（SDS）和巯基乙醇处理后再进行SDS 电泳时，得到等浓度的两条分离带，问该蛋白质样品是否纯?并解释理由 ? 2、测定蛋白质的含量的方法有哪几种？并简述其各自的原理 ? ? 3、有一个蛋白质分子在pH7的水溶液中可以折叠成球状，通常是带极性侧链的氨基酸位于分子外部，带非极性侧链的氨基酸位于分 子内部。请回答：（1）在Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中，哪些位于分子内部，哪些位于分子外部？（2）为什么在球蛋白内部和外部都能发现Gly和Ala？（3）Ser、Thr、Asn和Gln都是极性氨基酸，为什么会在分子内部发现？（4）在球蛋白的分子内部和外部都能找到Gys，为什么？ ? ? 4、木聚糖酶活性测定方法为木聚糖酶样品对底物——燕麦木聚糖进行水解，水解所产生的还原糖与DNS（3，5—二硝基水杨酸）试 剂共沸后在540nm下比色测定。已知以所得吸光值A值为横坐标，木糖浓度（0.64、0.96、1.28、1.6、1.92）为纵坐标，绘制的标准 曲线回归方程为 y = 4.89*A + 0.015；称取木聚糖酶样品0.25g，稀释至1000mL作为样品溶液；样品测定过程参见下表：反应结束后在540nm波长处测定样品空白（A0）和样品溶液（A）的吸光值分别为0.126和0.459。酶活力单位定义：在37℃、PH5.5条 件下，每分钟从燕麦木聚糖溶液中释放出1微摩尔的木糖定义为1个酶活力单位（U）。请依据以上信息，计算该木聚糖酶样品活性， 并列出计算公式。 ? 5、在核糖核酸酶功能性质的研究实验中，对样品进行SDS时发现，在最初的盐析组分中共有六种蛋白质和部分分子量小于 10Kda的多肽。已知核糖核酸酶相对分子质量约为13Kda，等电点PI为4.0左右，其它杂蛋白在SDS上显示分子量为20～100Kda之 间。试提出纯化核糖核酸酶的可能方案。 ? ? 6、试述引起蛋白质变性的原因和变性的实质与现象，在实验中应尽量采取哪些措施防止蛋白质变性？ ? ? 四、问答题(每小题 12 分，共 24 分)? 1、蛋白质工程的其中一项主要工作是构建工程菌株表达有价值的目的蛋白，其中毕赤酵母和大肠杆菌经常被用作表达载体。试论述 两种表达载体的优缺点及分别从两种体系提取重组蛋白的工艺流程。 ? 2、试论述蛋白质重要的生物学意义 福州大学 2006-2007学