酸价过氧化值TBA.docxVIP

油脂TBA值的测定方法原理油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酮之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，在532nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。试剂(1) TBA水溶液(现配现用)：准确称取TBA0.288g溶于水中，并稀释至100ml（如TBA不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至100ml），相当于0.02M；(2) 三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀释至100ml；(3) 氯仿（分析纯）；(4) 丙二醛标准溶液：称取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至1000ml，此溶液每ml相当于丙二醛100μg，置于冰箱内保存。准确吸取10ml，稀释至100ml，此溶液每ml相当于丙二醛10μg，备用。3. 操作步骤（1）标准曲线的绘制准确吸取每ml相当于丙二醛10μg的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中，加水至总体积为5ml，加入5mlTBA溶液，然后按样品测定步骤进行，测得光密度绘制标准曲线。（2）样品制备与检测准确称取均匀的豆油15g，置于100ml有盖三角瓶内，加入25ml三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结即在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。准确移取上述滤液10ml置于25ml比色管内，加入10mlTBA溶液，混匀，加塞，置于90℃水浴内保温40min，取出，冷却1h，移入小试管内，离心5min，上清液倾入25ml纳氏比色管中，加入5ml氯仿，摇匀，静置，分层，吸出上清液于532nm波长处，用2cm比色皿比色（同时作空白试验）。4. 计算:光密度(A532/kg)= 丙二醛含量（mg/Kg）= 式中C—从标准曲线查得丙二醛的相应浓度(ug/ml) m─油脂质量（g） V1─滤液体积（ml） V2─TBA（硫代巴比妥酸水溶液体积ml） V─三氯乙酸混合液体积（ml）5. 备注根据不同种类的油脂检测稍有不同：膨化大豆、鱼粉、虾料类称取10克、全价料、豆粕称取15克，然后提取的粗脂肪按上述步骤用1cm比色皿检测；猪油、鱼油称取10克, 豆油称取15克, 用2cm比色皿检测.油脂中过氧化值的测定1 原理油脂氧化过程中产生过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘，以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。2 要求2 过氧化值的测定2.1 试剂和溶液2.1.1饱和碘化钾溶液(现配现用)：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热使其溶解，冷却后贮于棕色瓶中；2.1.2 三氯甲烷–冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀； 2.1.3 0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液； 2.1.4 1%淀粉试剂：将淀粉0.5g用少许冷水调成糊状，倒入50ml沸水中调匀，煮沸，临时用现配；2.2 测定方法称取2~3g样品（称准至0.0002g）于碘量瓶中，加30ml三氯甲烷–冰乙酸混合液，使样品完全溶解。加入1ml饱和碘化钾溶液，紧密塞好瓶盖，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置3min，取出加100ml水，摇匀，立即以淀粉试液为指示剂，用0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色消失为终点。同时做空白试验。2.3 结果计算过氧化值按下式计算：POV(meq/kg)=式中：Ｃ ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L；Ｖ ——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液之体积，ml；Ｖ0——空白消耗硫代硫酸钠标准溶液之体积，ml；m ——样品质量，g；0.1269——换算系数粗脂肪的测定1原理索氏脂肪提取器中乙醚提取试样，称试样的减重，提取物中除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。测定方法2.1 仪器和试剂2.1.1 索氏脂肪提取器；2.1.2 恒温烘箱；2.1.3 电热恒温水浴锅；2.1.4 无水乙醚。2.2 操作步骤称取试样5g，用滤纸包好，放入105℃烘箱中烘2h，干燥器中冷却30min，称重，滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚（重蒸馏）60~100ml，在60~75℃水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。取出试样，放入105℃烘箱中烘2h，干燥器中冷却30min，称重。用原抽提器回收乙醚直至抽提瓶几乎全部收完。2.3 结果计算粗脂肪含量按下式计算： 粗脂肪（%）=式中： m 1——提取前试样与滤纸包之总质量，g；m 2——提取后试样与滤纸包之