微生物生长繁殖与遗传变异.pptVIP

§1. 单细胞微生物生长繁殖曲线 · 微生物生长量测定方法 比例计数法 已知霉菌孢子密度为8×108个/ml，根据显微镜视野中比例细菌密度为1×108个/ml Petroff-Hausser计数法 液体稀释法（MPN法） 最大可能数量表（most probable number， MPN ） 平板菌落计数法 菌落形成单位 （colony-forming unit， CFU） 滤膜法 快速计数滤纸片 ·单细胞微生物生长繁殖规律 ·生长曲线（growth curve）如何获得？ 根据测定生物量的方法不同，生长曲线分有： 重量法、数量法、浓度法等。 单批培养中微生物的生长曲线 接种量影响缓慢期长短与生长速率 营养物浓度的影响 培养温度的影响 ·连续培养 §2. 微生物的遗传变异 （一）经典转化实验（transformation）：F.Griffith 研究对象：Streptococcus pneumoniae（肺炎双球菌） SIII型菌株：有荚膜，菌落表面光滑，有致病性 RII型菌株：无荚膜，菌落表面粗糙，无致病性 Griffith转化试验示意 （2）细菌培养实验 ①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 ·DNA组成与构成 尿嘧啶uracil（存在于RNA中） 鸟嘌呤guanine 戊糖 两种戊糖: DNA所含的糖为β-D-2-脱氧核糖；RNA所含的糖为β-D-核糖。 糖与碱基构成核苷 (nucleoside) 糖与碱基之间的C-N键，称为C-N糖苷键。 磷酸与核苷构成核苷酸 核苷酸是核苷的磷酸酯。作为DNA或RNA结构单元的核苷酸分别是5′-磷酸-脱氧核糖核苷和5′-磷酸-核糖核苷。 · 微生物细胞中的核酸 核糖核酸（RNA） RNA分子量比DNA小，主要负责DNA遗传信息的 传递与翻译表达等。 RNA为单链分子，根据RNA的功能，可以分为mRNA、tRNA和rRNA三种。 mRNA (信使RNA) Messenger RNA mRNA约占总RNA的5%，不同细胞mRNA链长和分子量差异大 功能：将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地 – 核 糖核蛋白体上。 如DNA一条链上的碱基：A T G C G T T C C A C 转录成mRNA的碱基： U A C G C A A G G U G 遗传密码:mRNA分子上三个碱基（三联密码）决定一个 氨基酸。 tRNA (转移RNA) 约占总RNA的10-15%。 它在蛋白质生物合成中识别氨基酸的密码，并将相应的氨基酸转运到核糖核蛋白体上。 rRNA (核糖体RNA) 约占全部RNA的80%，是核糖核蛋白体的主要组成部分。 rRNA 的功能是与蛋白质生物合成相关。 ·基因与性状 ·细菌等微生物的变异 原生质体融合操作示意图 去壁 [A+B-] （高渗下） [A+B-] PEG或电脉冲 离心促融 去壁 [A-B+] （高渗下） [A-B+] 融合子（AA, BB, AB）长成菌落 检出[A+ B+]融合子 筛选优良性状的融合子 Ⅰ.降解石油的工程细菌 70年代美国生物学家(Chakrabarty)针对海洋输油，造成浮油污染，影响海洋生态等问题进行了研究。海水含盐量高，他发现90多种菌有不