中药新配方景丹胰敏剂治疗代谢综合征的方剂研究.docVIP

中药新配方景丹胰敏剂治疗代谢综合征的方剂研究 　　[摘要]以传统中医药学理论为基础，结合现代药物研究的体外分子作用靶点和体内动物实验，探索治疗代谢综合征的中药复方景丹胰敏剂（TD）的药材选择、复方的组成、配比及其有效剂量。应用高脂饲料诱导的胰岛素抵抗合并高胆固醇血症的IRF小鼠模型，以葡萄糖耐量（GTT）、胰岛素耐量（ITT）等指标评价机体对胰岛素的敏感性；以生化方法检测血糖和总胆固醇（TC）水平、以及分子靶点α-葡萄糖苷酶、蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）和谷氨酰胺：6-磷酸果糖酰胺基转移酶（GFAT）的活性。分别根据样品抑制PTP1B酶和α-葡萄糖苷酶活性、调节IRF小鼠血TC水平和抑制GFAT活性作用，选择西藏大花红景天的H13部位（h）、蛹虫草的Y12部位（y）和大黄的D部位（d）作为复方的组分；确定JD各组分治疗IRF小鼠代谢综合征具有协同作用；根据L8（27）正交试验设计和分别抑制分子靶点PTP1B和α-葡萄糖苷酶作用，确定JD各成分的最佳配比；根据JD对IRF小鼠的糖耐量低减和高胆固醇血症的治疗作用，确定JD的口服有效剂量。总之，配方JD由红景天、蛹虫草、大黄按比例20：1：1组成；其治疗代谢综合征的口服有效剂量为200mg?kg-1；其主要作用机制是抑制分子靶点PTP1B和α-葡萄糖苷酶。其中，红景天补气清肺，化淤养心，为君药；蛹虫草味甘性温，补肺气，益肾精，化痰浊，强腰膝，与红景天配伍，增强补益肺肾之功，为臣药；大黄泻热解毒，逐瘀通经，与君臣药物相配，发挥其祛逐邪毒淤滞之功，为佐使药。此三药配伍，共凑补气、益精、清热、活血、化痰之功效，用以治疗代谢综合征。 　　[关键词]方剂研究；胰岛素抵抗；高胆固醇血症；蛋白酪氨酸磷酸酶1B；α-葡萄糖苷酶 　　代谢综合征是以胰岛素抵抗、2型糖尿病/葡萄糖耐量低减、血脂紊乱、肥胖和高血压等为主要特征的一组症候群，属中医消渴症而并发眩晕、胸痹、肥胖、痹痛等证候，其基本病机为“正虚邪实”。“正虚”主要是气虚精亏，“邪实”主要是热、瘀、痰，其次是气滞、湿浊作祟。该疾病的发展进程首先是胰岛素抵抗和肥胖，继而出现脂代谢异常、2型糖尿病及其并发症。胰岛素抵抗在整个病程的发展中起着关键性作用，是代谢综合征中各种临床症状共同的病理生理基础。中医方剂功效是方内药物共同作用于机体产生的综合效应。运用辩证的思维针对病机的关键环节，进行合理组方，整体调节，既有利于疾病治疗，又可使方剂作用于机体发挥最佳的调节作用，与现代医学多靶点作用的网络药理学相吻合。 　　中药红景天富含多种微量元素和氨基酸，具有抗胰岛素抵抗、抗衰老、抗有害刺激、抗肿瘤及保护心血管等作用；蛹虫草具有和冬虫夏草相似的活性成分和药理作用，其主要成分之一虫草素具有一定降低血脂的作用；大黄酸属单蒽核类1，8-二羟基蒽醌衍生物，它能抑制脂肪细胞的分化和脂肪细胞合成，并对糖尿病肾病具有保护作用，具有一定的改善葡萄糖耐量、增强胰岛素敏感性和保护胰岛功能的作用。本文遵循中医治疗消渴症的补气、益精、清热、活血、化痰等基本原则，运用现代医学的研究技术，结合中医辨证论治的理论和中药多靶点作用的优势，分别以胰岛素、瘦素信号传导通路共同的负调节因子蛋白酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B）和延缓糖吸收的α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）作为研究靶点，在运用中药有效部位抑制分子靶点和调节高胆固醇血症的基础上，探索了治疗代谢综合征的中药新复方景丹胰敏剂（JD）的药材选择和复方的组成、配比及其有效剂量。 　　1 材料 　　红景天、蛹虫草、大黄等药材均购自北京同仁堂，由中国医学科学院药物研究所天然产物化学研究室鉴定、制备提取物。罗格列酮购自北京高盟化工有限公司；总胆固醇测定试剂盒为中生北控生物科技股份有限公司产品；中性胰岛素注射液产自美国LILY公司；葡萄糖等其他试剂均为分析纯试剂，购自北京北化精细化学品有限责任公司。 　　雄性4周龄C57BL/6J小鼠购自北京维通利华试验动物技术有限公司，合格证号SCXK（京）2006-0009，以自制的高脂高糖饲料诱导21周，形成胰岛素抵抗合并高胆固醇血症的肥胖小鼠模型（IRF）。综合考虑动物的胰岛素耐量、血TC水平和体重等因素，将模型动物随机分成模型对照（IRF）组、阳性药对照（Rosi）组、受试药（JD）组。同时设同批正常小鼠作为正常对照（Con）组。动物饲养于中国医学科学院药物研究所试验动物中心二级动物房，设施合格证SYXK（京）2009-0001。实验动物自由摄食饮水，饲养温度21～22℃，湿度40%～60%，光照/黑暗时间为12h/12h。实验过程符合《北京市实验动物管理条例》等实验动物道德伦理的相关规定。 　　阳性对照药物选