实验一收集动物组织的活细胞-rh.pptVIP

实验一 收集动物组织的活细胞并计数和测定成活率 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 问 题 如何知道每升血液中红细胞、白细胞、血小板的数量？ 如何知道水样中某小型生物的数量？ 如何知道发酵液中啤酒酵母的密度？ 如何知道生物制剂生产罐中细胞的密度？ Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验目的 学习机械分离法获得动物组织的活细胞 学会使用血球计数板测定细胞悬液的细胞密度 掌握活细胞和死细胞的鉴别方法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 收集动物组织的活细胞 从组织中分离单细胞的方法有多种： 对于较为柔软的组织（如肝脏、脾脏），可以采用机械研磨的方法分离细胞，但这会造成一些细胞的损伤而降低细胞的成活率； 对于比重差异较大的细胞，可以采用离心的方法来分离，例如血液中各种血细胞的分离； 对于股骨中骨髓细胞的分离，则可以采取冲洗股骨腔的方法获得。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验材料 小鼠 小鼠的抓法： 从鼠笼内将小鼠尾部抓住并提起，放在磁盘上或报纸上。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 小鼠的处死：颈椎脱位法 右手（左手）抓住鼠尾用力向后拉，同时左手（右手）拇指与食指用力向下按住小鼠头部，在颅骨基部的后侧与颈椎两侧，施加压力，使头颅和脑一起与脊髓分离。当脊髓与脑分离时，伴有大量的肌肉活动。经研究证明，这种方法能使实验动物对痛觉不再敏感。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 脾脏淋巴细胞悬液的制备 1.机械分离法 用镊子将脾脏置于尼龙布上，用注射器推棒轻轻挤压组织，使细胞分散。将尼龙布置于玻璃漏斗中，用D-Hank’s 液冲洗尼龙布，收集细胞悬液于离心管中。 2.低渗溶解红细胞（红细胞溶血） 0.87% NH4Cl 溶液 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 股骨骨髓细胞悬液的制备 冲洗骨髓腔 ： 用剪刀剪开股骨的一端，将注射器针头插入股骨开口端。然后用剪刀剪开股骨的另一端，用D-Hank’s液多次冲洗骨髓腔，收集细胞悬液于离心管中。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. D-HANK’S液(无钙镁离子的HANK’S液) 配方 NaCl 80.0克 Na2HPO4?2H2O 0.6克 （如为12H2O，则需1.2克） KCl 4.0克 KH2PO4 0.6克 双蒸水 1000毫升 原液稀释10倍即为使用液------ D-Hank’s液 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspo