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- 2017-04-01 发布于湖北
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第三章 生物制品的制备P62NP80 细胞破碎 定义:细胞破碎是指选用物理、化学、酶或机械的方法来破坏细胞壁或细胞膜 目的:破坏细胞的外壳,使细胞内含物有效地释放出来,获得有效的提取。 细胞破碎是生物大分子初级分离纯化的第一步,也是一个重要环节,它直接影响了产物的加收率及纯度 一、机械破碎方法 通过机械运动所产生的剪切力的作用,使细胞破碎的方法称为机械破碎法。 二、物理破碎方法 通过各种物理因素的作用,使组织细胞破碎的方法,统称为物理破碎方法。 物理破碎方法多用于微生物细胞的破碎。 三、化学破碎方法 化学破碎方法:通过化学试剂的作用,使细胞膜的结构改变或破坏,使细胞膜的透过性改变。 常用的化学试剂可分为有机溶剂和表面活性剂两大类。 十二烷基硫酸钠:SDS 四、酶学破碎方法 酶学破碎方法:利用溶解细胞壁的酶(外加的或细胞本身存在的酶)处理菌体细胞,使细胞壁受到破坏后,再利用渗透压、冲击等方法破坏细胞膜 分为:外加酶制剂和自溶法。 自溶作用 自溶作用是利用生物体自身产生的酶来溶胞,而不需外加其他的酶。 在微生物代谢过程中,大多数都能产生一种能水解细胞壁上聚合物的酶,以便生长过程继续下去。 自溶作用:改变其生长环境(温度、pH、缓冲液),可以诱发产生过剩的这种酶或激发产生其它的自溶酶,以达到自溶目的。 缺点:易引起所需蛋白质的变性,自溶后细胞悬浮液粘度增大,过滤速度下降。 三、各
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