生物制药--人源化单克隆抗体（副本）.pptVIP

4.3.微胞杂交干细胞技术 ——日本学者Ishida等首先提出 技术要点： 首先将抗G418的人成纤维细胞与小鼠的A9细胞融合，通过筛选，得到抗G418的小鼠A9细胞，再运用PCR或原位荧光杂交方法筛选，先筛选出的细胞用秋水仙素处理48h，然后用细胞松弛素B处理并高速离心，分离出含2号、14号、22号染色体的小鼠。 人源抗体在这种转基因小鼠的产量还比较低。 4.4.其他方法 XTL生物制药公司使用一种类似于人骨髓移植的方法，用放射线破坏动物骨髓，然后注入人抗体生成细胞。该公司已用此法生产出一种全人单抗。 * 近年来 ,人源化抗体和人抗体的出现为临床应用带来了新的希望 ,当前正处于临床研究的多种抗体中 , 嵌合抗体和 人 源 化 抗 体 所 占 比 例 大 于70 %。目前的人源化抗体 ,主要用于肿瘤、 自身免疫性疾病和心血管疾病的治疗以及抗移植排斥反应和抗病毒感染等方面。 人源化抗体的临床应用 * 1 .在肿瘤治疗方面的应用: 单抗药物抗肿瘤能有效地降低传统肿瘤药物治疗的不良反应。如2005年我国开发出癌症治疗药——重组人源化抗人表皮生长因子受体单克隆抗体(商品名：泰欣生)。泰欣生联合放疗治疗鼻咽癌的完全缓解率比单纯放疗的患者提高30%以上。 2 .在器官移植中的应用: 近年来 ,利用抗体药物作为实体器官移植的诱导治疗逐渐增加。如1986年批准进入美国市场的治疗性抗体类药物抗 CD3单抗即被用于肾、 心脏、 肝脏移植排斥的逆转。 3 .在心血管疾病方面的应用： 美国 FDA 于 1994 年批准了第一个人-鼠嵌合 Fab 抗体的上市，该抗体现已被广泛应用于多种心血管疾病治疗 ,主要用于预防冠状动脉成形术后的再狭窄。 * 4 .在自身免疫性疾病方面的应用: 现有的研究表明 ,抗体对类风湿性关节炎、 系统性红斑狼疮、 牛皮癣、 多发性硬化、 硬皮病、 溃疡性结肠炎等疗效较好。 5 . 在抗病毒感染方面的应用： 近年来研究表明 ,在 HBV、HCV、 HIV 等病毒感染性疾病中 ,人源化抗体显示了较好的应用前景。如：商品名为 SynagisTM的抗呼吸道病毒感染的抗体在美国已经上市 ,为人源化的基因工程抗体。 应用单克隆抗体后的患者症状改善率 总结 到目前为止，至少有35个完全人类的单抗已经进入临床的治疗实验阶段。这些单抗的靶抗原都是临床癌症、自身免疫疾病或炎症疾病和传染病中的主要抗原。例如EGFR、CTLA-4和CD4等。在治疗一些异种移植、骨质疏松症等疾病已有显著的效果。 抗体人源化以及完全人源化抗体的制备已经成为当今治疗性抗体的发展趋势，同时，各种抗体衍生物免疫原性低、更易通过血管壁到达病源，通过PEG化等方法可以延长其半衰期；人抗体是否可以解决鼠抗体运用中出现的所有问题，还有待大量临床试验的检验。所以可行的方法就是在完善人抗体技术的同时，推进治疗性小分子抗体衍生物的研究，根据临床的实际设计灵活有效的治疗方案，使人源化抗体和小分子抗体互为补充。 Thanks! * * 基因型和表型联系 HAMA效应 抗体人源化分为 （1）嵌合抗体：用人源抗体恒定区替换鼠源抗体恒定区，保留抗体可变区。 （2）人源化抗体:可变区中仅CDR（互补决定区）为鼠源，其FR(框架区)及恒定区均来自人源。 治疗性单抗人源化发展历程 人源化单克隆抗体的 研究进展和应用 组员：洪武平 王松振 王雁庆 曾亚威 09生物技术 单克隆抗体在理论和实践上的应用成为解决生物学和医学等许多重大问题的重要手段。但是，上述应用的单抗属于鼠源性，鼠源性单抗应用于人类的临床应用结果反映出了单克隆抗体药物存在的一些问题 : (1) 鼠源性单抗容易容易产生人抗鼠抗体(HAMA) ,在体内作为异源蛋白被清除掉，从而削弱其治疗的有效性 。 (2) 鼠源性单抗在人体内生物活性降低，不能有效地激活人体的生物效应。 研究背景 因此，人们一直致力于人源性抗体的研究。 人源化治疗性单克隆抗体的研究进展 构建的基本思路 鼠抗体人源化就是通过基因改造，使其和人体内的抗体分子具有极其相似的轮廓，从而逃避人免疫系统的识别，避免诱导HAMA（人抗鼠抗体）反应。 遵守两个原则 首先，要保持抗体的亲和力和特异性； 其次，要降低或消除抗体的免疫原性。 以分子生物学技术提取、扩增编码人抗体的DNA，构建质粒，建立组合抗体文库，再利用供者文库建立针对某一特定抗原的子文库。 以该技术制备的抗体片段(Fab)是人源抗体，具有建库简单、抗体表达稳定等特点