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临床 血液实验诊断 黄伏生 概述: 血细胞的来源与生成 第一节 血液一般检验（blood routine test） 血液： 有形成分：红细胞、白细胞、血小板（某些病理物质如MP）。 无形成分：水、无机物、有机物。 RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、Ret、ESR等 一、红细胞检查 〔原理〕 用稀释液将血液稀释一定的倍数，混匀后冲入计数池，在显微镜下计数一定体积的红细胞数，再换算成每升血液中红细胞数量。 红细胞计数（手工） 〔器材〕显微镜、计数板、微量吸管、试管等。 〔试剂〕红细胞稀释液（Hayem液） NaCl1.0g 、Na2SO42.5g 、HgCl20.5g、蒸馏水加至1000ML 〔操作〕 1.稀释液2ML+全血10μL混合均匀 2.充池 3.计数 4.换算 公式 RBC/L=N*5*200*10*106 N－－RBC个数/5个中方格中 1/5×25－－换成1个大方格 200――稀释倍数 10――换算成mm3 106――由1mm3换算成1L体积 RBC/L＝1/100N*1012/L (*1012 /L ----T/L) 1.生理变化 2.病理变化 （应与HGB等指标同时进行分析） 临床意义 血红蛋白测定（HGB） （一）氰化高铁血红蛋白测定（HiCN）法 HiCN的mmol消光系数――44mmol/L/cm 〔原理〕 血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再与CN－结合生成稳定的 综红色复合物－氰化高铁血红蛋白（HiCN），HiCN在波长540nm处有一吸收峰，通过分光光度计测定该处的吸光度，再换算成每升血中血红蛋白浓度，也可制备标准曲线供查阅其含量。 [操作] 1.试剂5ml+全血20μl混匀放置放置5min 2.比色：分光波长为540nm，杯径1.0cm测定 光密度A 3.计算Hb=A*64458/(44*1000)*251=367.7A 4.标准曲线法：简易标准曲线K=∑Hb/ ∑A 还可采用回归方程法 blood: （二）其他方法 1.Sahli法 2.HiN3法 3. SDS法 （三）? 临床意义：与RBC相结合 红细胞比容测定 温氏法原理（Wintrobe）(手工)  〔操作〕 1.将抗凝血注入温氏管刻度处，用橡皮塞塞紧管口 2.离心：3000r/min离心30min 3.结果观察：读取最下面红细胞层 〔参考值〕男性：（0.40～0.54）L/L 女性：（0.37～0.47）L/L 〔临床意义〕主要用于计算红细胞的3个 平均指数 1.增高：多见于各种原因引起的血液浓缩 2.降低：主见于各种贫血 微量法： 与常量法基本相同 不同的是离心管改用微量管 离心速度为12000r/min*5 仪器法：HCT=MCV*RBC 红细胞平均指数 红细胞平均容积 （MCV,men corpuscular volume） 红细胞平均血红蛋白含量 （MCH, men corpuscular hemoglobin） 红细胞平均血红蛋白浓度 （MCHC, mem corpuscular hemoglobin concentration） 〔计算公式〕 1. MCV=HCT/RBC(fL) 2.??????MCH=HGB/RBC(pg) 3.????? MCHC=HGB/HCT(g/L) 参考值] 手工法 仪器法 MCV (80-92)fl (80-100)fl MCH (27-31)pg (27-34)pg MCHC (320-360)g/l (320-360)g/l [临床意义] 可作为贫血的红细胞形态学分类 红细胞体积分布宽度 红细胞体积分布宽度 （RDW,red blood cell distribution width）是血液分析仪特有的检测项目 〔原理〕 利用coulter原理测定红细胞体积，根据红细胞不同体积的大小在坐标上排列成一条曲线（直方图）将曲线的底部的宽与曲线的高度的比所得值。 coulter原理测定血细胞示意图 μL 不同时间段所测红细胞频数(t) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11