微生物的遗传变异和育种详解.ppt

第七章 微生物的遗传变异和育种 第七章 微生物的遗传变异和育种 第一节 遗传变异的物质基础 第二节 基因突变和诱变育种 第三节 基因重组和杂交育种 第四节 基因工程 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 一、证明核酸是遗传物质基础的三个经典实验 （一）经典转化实验（transformation）：F.Griffith 研究对象：Streptococcus pneumoniae（肺炎双球菌） SIII型菌株：有荚膜，菌落表面光滑，有致病性 RII型菌株：无荚膜，菌落表面粗糙，无致病性 1928年，Griffith进行了以下几组实验： （1）动物实验 对小鼠注射活RII菌或死SIII菌 ————小鼠存活 对小鼠注射活SIII菌————————小鼠死亡 对小鼠注射活RII菌和热死SIII菌 ———小鼠死亡 抽取心血 分离 活的SIII菌 Griffith转化试验示意 （2）细菌培养实验 ①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 （二）噬菌体感染实验 A. D. Hershey和M. Chase， 1952年 以32S标记蛋白质外壳做噬菌体感染实验 （2）含35S-蛋白质的一组：放射性75%在上清液中 （三）植物病毒的重建实验 为了证明核酸是遗传物质，H. Fraenkel-Conrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒（TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。 将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡，就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草并使其患典型症状，而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。 选用TMV和霍氏车前花叶病毒（HRV），分别拆分取得各自的RNA和蛋白质，将两种RNA分别与对方的蛋白质外壳重建形成两种杂合病毒： （1）RNA（TMV）- 蛋白质（HRV） （2）RNA（HRV）- 蛋白质（TMV） 用两种杂合病毒感染寄主： （1）表现TMV的典型症状病分离到正常TMV粒子 （2）表现HRV的典型症状病分离到正常HRV粒子。 上述结果说明，在RNA病毒中，遗传的物质基础也是核酸。 2、质粒的特征 （1）形状大小：超螺旋结构、106 ~ 108Da、1%核基因组大小。 （2）数量：每个菌体内有一个或几个、或很多。 （3） 质粒上携带有某些核基因组上所没有的基因，使原核生物的生长繁殖过程中增添了一些特殊功能，如：接合、产毒、抗药、固氮、产特殊酶、降解毒物等。 （4） 是一种独立存在于细胞内的复制子。 严紧型复制控制：复制行为与核染色体的复制同步。 松弛型复制控制：复制行为与核染色体的复制不同步。 （5） 少数质粒可在不同菌株间转移，如：F因子、R因子。 （6） 质粒消除：因某些理化因素的影响致使质粒复制受抑而核染色体的复制仍继续进行，从而引起子代细胞中不带质粒的现象。 （7） 有些质粒具有与核染色体整合和脱离的功能——附加体。 （8） 质粒还有重组的功能：可在质粒与质粒间、质粒与核染色体间发生基因重组。可用作基因工程的载体。 3、质粒的种类（质粒所编码的功能和赋予宿主的表型效应） （7）降解性质粒（代谢质粒 ）假单胞菌中发现，可为降解一系列复杂有机物的酶编码。在污水处理、环境保护等方面有特有作用。 （5） Ri质粒 发根土壤杆菌或发根农杆菌中，可侵染双子叶植物的根部，并诱生大量毛状的不定根。 第二节 基因突变和诱变育种 一、 基因突变 二、突变与育种 一、 基因突变（突变） 是变异的一类。凡指细胞内或病毒粒内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化。可自发或诱导产生。 狭义的突变：专指基因突变（点突变）。 广义的突变：包括基因突变和染色体突变。 突变的几率：很低——10-6 ~ 10-9。 野生型菌株（wild type strain，野生型）：从自然界分离到的、没有发生过突变的菌株。 突变株（mutant，突变体、突变型）：野生型经突变后形成的带有新性状的菌株。 1. 营养缺陷型（auxotroph） 某一野生菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力，因而无法在基本培养基（minimum medium，MM）上正常生长繁殖的变异类型。 2. 抗性突变型（resistant mutant） 野生菌株因发生基因突变，而产生的对某化学药物或致死物理因子的抗性变异类型。 3. 条件致死突变型（conditional lethal mutant） 某菌株经基因突变后，在某种条件下可正常地生长繁殖，而在另一条件下却无法生