中山大学《细胞生物学》思考题 2012年2.pdfVIP

1创新三部曲 解读 感悟 灵感 2第二信使的特征与类型 两个特征: ●是第一信息 同膜受体结合 后最早在细胞 膜内侧或胞浆 中出现，仅在 细胞内部起作 用的信息分子 ●能启动或调 节细胞内稍晚 出现的反应。 主要种类: ● cAMP、 ● DAG、 ● IP3、 ● cGMP ● Ca2+。 3Two types of intracellular signaling proteins that act as molecular switches 4表面受体的研究方法 Receptors Can Be Purified by Affinity Techniques（亲和 技术）or Expressed from Cloned Genes ◆ Affinity labeling（亲和标记） In this technique, cells are mixed with an excess of a radiolabeled ligand for the receptor of interest. After unbound ligand is washed away, the cells are treated with a chemical agent that covalently（共价） cross- links bound labeled ligand molecules and receptors on the cell surface. Once a radiolabeled ligand is covalently cross-linked to its receptor, it remains bound even in the presence of detergents and other denaturing （变 性）agents. ◆ Functional expression assay 5Affinity labeling technique 研究思路？ ◆一条扁担 ◆标识 放射性 荧光 6光亲和标记分离法 ？ 75.4 G Protein–Coupled Receptors Adenylyl Cyclase：腺苷酰基环化酶 8蛋白激酶A与蛋白激酶C的信号解除 cAMP的 信号解除 DAG、IP3、 Ca2+的信号解除 抑 制 型 系 统 cAMP 的 水 解 DAG 信 号 解 除 IP3 信 号 解 除 Ca2+ 信 号 解 除 9蛋白激酶与磷酸化酶比较 ？ 10 与酶联受体信号相关的四种结构域 ◆SH2:Src homology 2 domain 长100氨基酸残基中的四个特征性结构 PI 3激酶识别：pTyr-Met-X-Met ◆SH3:Src homology 3 domain 与富含Proline的50个氨基酸残基的特征结构结 合：PXXP ◆PTB:phosphotyrosine-binding domain Asn-Pro-X-Tyr ◆PH:Src homology 2 domain 与特异的磷酸肌醇结合的结构域 Src: Src蛋白是一类膜相关的蛋白激酶 src:癌基因，v-src是第一个发现的反转录病毒 癌基因。 11