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免疫学发展的研究

基础医学部检验专业综述 综述题目:_免疫学发展的研究________ 姓  名:___胡佳凤 ____ _ 班 级:___医检(2)班___ _ _ _ 学 号:___1104141073 __ _ ___ 成 绩:______ _ _____ _ 年 月 日 免疫学发展的研究 摘要:免疫学检验技术在临床医学和科研分析中占有重要作用,其发展也会为其他医学学科提供理论依据和技术支持。现代免疫学检验技术源于标记技术在免疫学中的应用。科技的进步推动免疫检验技术的迅速发展,正从单一的免疫诊断 技术向单细胞、多基因、微量化等方面发展。而哮喘、器官和骨髓移植、自身免疫性疾病、变态反应、淋巴细胞和浆细胞的恶性肿瘤以及继发性和原发性免疫缺陷的临床诊断都客观要求免疫学检验技术更加精确,并且能够定量评价临床治疗的有效性。 关键词:免疫学检验技术;荧光素标记;酶标记 一、研究进展 1.1荧光素标记抗体技术 1.1.1流式细胞免疫荧光分析技术是建立在免疫荧光、免疫微球和流式细胞分析等实验技术基础上的一种新的血清学实验方法。利用荧光对抗体进行染色可以获得所需信息的原理而研制的流式细胞仪,具有激光技术、电子计算机技术和单克隆抗体技术特点,主要用于细胞表型、细胞内及核膜成分、DNA含量等领域的分析。它在同一试管中同步检测多种靶物质的潜在特征,受到许多临床检验学者的关注。迄今尚未进入临床应用。 1.1.2四聚体分析技术利用 T细胞表面的 TCR 可与构建的四聚体的表位肽相互作用而精确识别,从而可以高亲和力结合,进而达到检验抗原特异性 T细胞的作用[1]。在此分析技术上衍生的检验方法主要有 MHC- 肽四聚体流式细胞技术、原位MHC- 肽四聚体染色法、MHC- 肽四聚体磁分离技术、MHC- 肽四聚体 ELISA 技术、MHC- 肽四聚体分子微阵列技术等,主要用于肿瘤抗原特异性 T细胞、病毒等的检验。 1.1.3间接免疫荧光技术用作细胞内抗原定位或相应抗体检测的对照标准,主要用于抗病原体、抗核抗体、抗平滑肌抗体等以及其他呼吸道病原体抗体的检测等。可降低手工操作的误差以及提高标准化检测和自动化程度。该技术比较成熟,已经可以进行商品开发。 1.2酶标记免疫检验技术 1.2.1酶联免疫吸附试验技术理论上只要是某一抗原纯品或相应的抗体,都可以用酶联免疫技术进行检测,因此,可溶性抗原、抗体系统都可以用该技术进行检测,广泛应用于各种微量蛋白(例如细胞因子、小分子激素、肿瘤标志物等)和血源病原体(抗原和抗体)。酶联免疫吸附试验技术(ELISA)以免疫过氧化物技术为基础,敏感性高,特异性强,操作简便,易于观察,便于大规模检查。已经用于临床应用。 1.2.2酶联免疫斑点技术是一种用于测定B 细胞分泌免疫球蛋白、T 细胞分泌细胞因子功能的分析技术,是定量酶联免疫吸附试验技术的发展和延伸。酶联免疫斑点技术的原理是在微孔培养板底部植入抗 CK或 Ig的特异性单克隆抗体。待检测样本进入微孔板内培养时,在有丝分裂原或者特异性抗原的作用下,活化记忆型 T 细胞或 B细胞,产生 CK或 Ig。细胞下方的固相单克隆抗体就会捕获 CK或 Ig物质。细胞被清洗后,加入生物素化的第二抗体,抗体和 CK或 Ig物质结合后,再加以酶做标记的生物素或亲和素反应,以酶底物显色,阳性细胞就可形成直径约 50~200μm 大小不等的圆形着色斑点[2],每一个斑点对应分泌 CK 或 Ig 的一个细胞,而特定阳性 T、B 细胞族群的产生则可以通过斑点直径的大小可以直接反映。酶联免疫斑点技术既可用于分泌抗体的 B细胞,也可用于分泌各类 CK的 T细胞。酶联免疫斑点技术也是 T细胞功能检测的标准技术,具有较高的检测灵敏度[3]。 1.3新型标记免疫检验技术 1.3.1元素标记免疫检验技术元素标记免疫检验技术中的标记元素主要有镧系元素(Eu3+,Tb3+,Sm3+)和钌元素(Ru),其检验技术分别是分辨荧光免疫分析技术和电化学发光免疫分析技术。前者可以应用在两种指标的同时测定[4],后者可以在电场作用下反复被激发而使信号得以放大。 1.3.2核酸标记免疫检验技术其设计原理是核酸的扩增或转录翻译[5],扩增是 DNA 通过聚合酶链反应在较短的时间内按几何级数扩增,可以达到数百万倍;而转录翻译则是通过标记的抗体 DNA 与抗原反应后进行胞外转录翻译成相应的酶进行测定。这两种方法的检测都有较大的灵敏性,但还处在研究阶段。 1.3.3量子点标记免疫检验技术 在传统的标记免疫分析技术中,放射免疫分析存在污染,酶免疫分析灵敏

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